Nosso grupo de pesquisa teve início em 2009 no Departamento de Química da Faculdade de Filosofia Ciências e Letras de Ribeirão Preto e durante esses 11 anos temos trabalhado no desenvolvimento de métodos cromatográficos e eletroforéticos enantiosseletivos para posteriores estudos de biotransformação (utilizando fungos como agentes catalisadores) e de metabolismo in vitro (utilizando microssomas hepático de humanos). Nesse sentido temos utilizado a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e a eletroforese capilar (CE) como técnicas de análise. Além disso, devido à natureza das matrizes em análise (meio de cultura e microssomas hepático) como técnica de preparo de amostras temos trabalhado com algumas técnicas miniaturizadas de extração, como por exemplo, a microextração em fase sólida (SPME), a microextração em fase líquida empregando membranas cilíndricas ocas (HF-LPME) e a microextração líquido-líquido dispersiva (DLLME). Portanto, nossa linha de pesquisa segue duas frentes, uma relacionada ao desenvolvimento de métodos para serem aplicados nos estudos de biotransformação e outra nos estudos de metabolismo in vitro. O texto apresentado nesse trabalho compila os principais resultados do nosso grupo de pesquisa nessas duas linhas descritas. Os resultados aqui apresentados estão presentes nas teses, dissertações e artigos publicados por nosso grupo ao longo desse período. O objetivo do texto foi relatar, de maneira objetiva e crítica, a evolução científica do nosso grupo. O Capítulo 1 apresenta uma introdução aos temas essenciais descritos no texto. Assim relata uma breve revisão acerca da separação enantiosseletiva por cromatografia líquida de alta eficiência e eletroforese capilar. Além disso, discute objetivamente técnicas de preparo de amostras, focando na microextração em fase sólida, microextração em fase líquida e microextração líquido-líquido dispersiva. No Capítulo 2 é descrito o desenvolvimento dos métodos enantiosseletivos para análise de fármacos após biotransformação por fungos. Além disso, nesse capítulo são discutidas as limitações e vantagens do emprego da eletroforese capilar e das técnicas miniaturizadas de preparo de amostras nesses estudos. No Capítulo 3 é descrito o desenvolvimento dos métodos enantiosseletivos para análise de praguicidas após metabolismo in vitro por microssomas hepático de humanos. Além disso, nesse capítulo é discutido a determinação dos parâmetros enzimáticos obtidos, assim como a correlação in vitro, a predição de parâmetros toxicocinéticos e a identificação das principais enzimas do citocromo P450 responsáveis pelo metabolismo dos praguicidas estudados. Finalmente, ao final de cada subtópico, o efeito inibitório dos praguicidas quirais sobre as enzimas do citocromo P450 é relatado. No Capítulo 4 são apresentadas as considerações finais e perspectivas do nosso grupo de pesquisa.

Our research group started in 2009 at the Department of Chemistry of the Faculty of Philosophy, Science and Letters of Ribeirão Preto and during these 11 years we have been working on the development of enantioselective chromatographic and electrophoretic methods for further biotransformation studies (using fungi as catalyst agents) and in vitro metabolism (using human liver microsomes). In this sense, we have used high performance liquid chromatography (HPLC) and capillary electrophoresis (CE) as analysis techniques. Furthermore, due to the nature of the matrices under analysis (culture medium and liver microsomes) as a sample preparation technique, we have been working with some miniaturized extraction techniques, such as solid phase microextraction (SPME), hollow fiber liquid-phase microextraction (HF-LPME) and dispersive liquid-liquid microextraction (DLLME). Therefore, our line of research follows two fronts, one related to the development of methods to be applied in biotransformation studies and the other in in vitro metabolism studies. The text presented in this work compiles the main results of our research group in these two lines described. The results presented here are present in the theses, dissertations and articles published by our group during this period. The objective of the text was to report, in an objective and critical way, the scientific evolution of our group. Chapter 1 provides an introduction to the essential themes described in the text. Thus, it reports a brief review about the enantioselective separation by high performance liquid chromatography and capillary electrophoresis. In addition, it objectively discusses sample preparation techniques, focusing on solid-phase microextraction, hollow -fiber liquid-phase microextraction and dispersive liquid-liquid microextraction. In Chapter 2 the development of enantioselective methods for drug analysis after biotransformation by fungi is described. In addition, this chapter discusses the limitations and advantages of using capillary electrophoresis and miniaturized sample preparation techniques in these studies. Chapter 3 describes the development of enantioselective methods for analyzing pesticides after in vitro metabolism by human liver microsomes. In addition, this chapter discusses the determination of the enzymatic parameters obtained, as well as the in vitro correlation, the prediction of toxicokinetic parameters and the identification of the main cytochrome P450 enzymes responsible for the metabolism of the pesticides studied. Finally, at the end of each subtopic, the inhibitory effect of chiral pesticides on cytochrome P450 enzymes is reported. Chapter 4 presents the final considerations and perspectives of our research group.