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Tese de Doutorado
DOI
https://doi.org/10.11606/T.9.2020.tde-25062021-163046
Documento
Autor
Nome completo
Fabiana da Silva Lima
E-mail
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
São Paulo, 2020
Orientador
Banca examinadora
Fock, Ricardo Ambrosio (Presidente)
Cintra, Dennys Esper Corrêa
Minicucci, Marcos Ferreira
Ong, Thomas Prates
Título em português
Avaliação do magnésio na capacidade imunomodulatória de células tronco mesenquimais e sua ação sobre células hematopoiéticas em modelos experimentais in vitro e in vivo
Palavras-chave em português
Anti-inflamatório
Células imune
Citocinas
Medula óssea
Mineral
Resumo em português
O magnésio (Mg2+) é um mineral que apresenta potencial anti-inflamatório, e dados da literatura mostram que o consumo adequado ou o enriquecimento de dietas com esse mineral pode ser benéfico para o sistema imunológico. Por outro lado, a deficiência de Mg2+ no organismo pode contribuir para alterações no sistema imunológico e para a formação de processo e mediadores inflamatórios, com capacidade de influenciar a complexa regulação tanto da hemopoese quanto dos mecanismos envolvidos no processo imunológico/inflamatório. Sabendo-se que o Mg2+ é indispensável para diversas funções celulares, o presente trabalho buscou investigar os efeitos in vitro do enriquecimento com Mg2+ sobre alguns mecanismos da capacidade imunomodulatória das CTMs e também as repercussões da hipomagnesemia sobre a medula óssea e sangue periférico em camundongos. Foram utilizadas células C3H/10T1/2, cultivadas com diferentes concentrações de Mg2+, células RAW 264.7 e também linfócitos primários de camundongos C57Bl/6 cultivados com "meios condicionados". Os resultados mostraram aumento significativo da proliferação de células C3H/10T1/2 cultivadas em meio enriquecidos com Mg2+, diminuição da produção de citocinas inflamatórias e diminuição da fosforilação de NF-κB. A análise do efeito desse tratamento sobre outras células imunes resultou em modificação da produção de citocinas pelos linfócitos e células RAW 264.7, agindo sinergicamente com as moléculas produzidas pela célula C3H/10T1/2 potencializando o efeito imunossupressor. Para a investigação dos efeitos da deficiência de Mg2+ sobre as células da medula óssea e sangue periférico, foram utilizados camundongos C57BL/6, machos e adultos, dividido em 2 grupos, controle (dieta AIN93M) e deficiente em Mg2+ (AIN93M com 90% de restrição de Mg2+) por 4 semanas. Os resultados mostraram que a deficiência dietética de Mg2+ resultou em aumento de neutrófilos no sangue periférico e de células jovens na medula óssea, e também alteração no ciclo celular e aumento da expressão de genes e proteínas relacionados à diferenciação de granulócitos
Título em inglês
Evaluation of magnesium in the immunomodulatory capacity of mesenchymal stem cells and its effects on the hematopoietic cells in experimental models in vitro and in vivo
Palavras-chave em inglês
Anti-inflammatory
Bone marrow
Cytokines
Immune cells
Mineral
Resumo em inglês
Recent research works have shown that magnesium (Mg2+) has anti-inflammatory potential, and that adequate intake or enrichment of diets with this mineral may have a beneficial role on the immune system. On the other hand, the low-magnesium diet may contribute to changes in the immune system and to the development of inflammatory mediators and processes, with capacity to influence the complex regulation of the hemopoiesis and as well as the mechanisms involved in the immunological/inflammatory response. Knowing that Mg2+ is indispensable for several cellular functions, this work aims to investigate the effects of culture medium enrichment with magnesium on some mechanisms of the immunomodulatory capacity of MSCs and also the repercussion, in mice model, of the magnesium deficiency on bone marrow and peripheral blood cells. C3H/10T1/2 cells were grown with different concentrations of Mg2+, and both cells RAW 264.7 and primary lymphocytes from C57BI/6 mice were cultivated using "conditioned media". The results demonstrated that C3H/10T1/2 cells cultivated in medium supplemented with Mg2+ showed a significant increase in the proliferation, decreased production of inflammatory cytokines, in addition to decreasing phosphorylation of NFκB. Subsequently, the analysis of this treatment effect on the other immune system cells using "conditioned media" led to a modification of the production of some cytokines by lymphocytes and RAW 264.7 cells, acting synergistically with the molecules produced by the C3H/10T1/2 cell, boosting its effect immunosuppressant. To investigate the effects of Mg2+ deficiency on bone marrow cells and peripheral blood, C57BL/6 mice, males, adults, divided into 2 groups, fed AIN93M or AIN93M with 90% Mg2+ restriction for 4 weeks. We observed that dietary Mg2+ deficiency resulted in increased peripheral blood neutrophils and bone marrow immature cells, as well as increased gene and protein expressions related to granulocyte differentiation and cell cycle changes in hematopoietic cells
 
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Data de Publicação
2021-07-08
 
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