O câncer cervical ou câncer do colo do útero é causado pela infecção persistente pelo papilomavírus humano (HPV), principalmente pelos genótipos de alto risco, como o HPV-16 e o HPV-18. Apesar dos tratamentos disponíveis, a doença ainda é considerada um problema de saúde pública e novas abordagens para o tratamento de lesões pré-malignas e tumores cervicais se fazem necessárias. Neste contexto, o presente trabalho tem como objetivo o desenvolvimento de uma estratégia imunoterapêutica baseada na administração de células dendríticas (DCs), diferenciadas in vitro a partir de células precursoras da medula óssea (BM-DCs), para o controle de tumores associados ao HPV-16. BM-DCs derivadas de células de camundongos naive, ou com tumor, foram padronizadas quanto ao processo de diferenciação e ativação in vitro com a proteína gDE7 e outros componentes imunomodulatórios, como citocinas e agonistas da resposta imune inata. A proteína gDE7 é o resultado da fusão genética da glicoproteína D (gD) do Herpes simplex vírus-1 (HSV-1) e da oncoproteína E7 do HPV-16 e possibilita o direcionamento de antígenos e ativação de DCs. Após a confirmação do efeito responsivo das BM-DCs sensibilizadas com a gDE7, animais de linhagem C57BL/6 desafiados com células da linhagem TC-1 foram tratados com 3 doses de BM-DCs (1x106/animal) sensibilizadas com a gDE7 e poly (I:C) por via intravenosa (i.v.) ou subcutânea (s.c). Foi observado controle parcial do volume tumoral nos grupos imunizados com as células ativadas com a gDE7 na presença ou ausência do poly (I:C). A administração pela via i.v. resultou em maior proteção antitumoral com 80% de animais livres de tumor e aumento de linfócitos T CD8+ E7-específicos ativados no sangue periférico e no baço dos animais tratados. Os animais tratados apresentaram aumento na produção de IFN-γ por células T de memória efetora. Além disto, a imunoterapia baseada nessa estratégia favoreceu o influxo de células NKs no baço e resultou em proteção em modelo de recidivas, simuladas por meio de repetições de implantes de células tumorais.. Esses dados embasam o desenvolvimento de uma nova abordagem imunoterapêutica voltada para o tratamento de tumores induzidos pelo HPV em condições clínicas.

Cervical cancer is caused by persistent human papillomavirus (HPV) infection, mainly by high-risk genotypes, such as HPV-16 and HPV-18. Despite the availability of treatments, the disease is still considered a public health problem and new therapeutic approaches aimed at treating premalignant lesions and cervical tumors are needed. In this context, the present work aims to develop an immunotherapeutic strategy based on the administration of dendritic cells (DCs) derived from in vitro differentiated bone marrow precursor cells (BM-DCs) for the control of HPV-16 associated tumors. BM-DCs derived from naïve mice, or tumor bearing mice, were standardized with regard to the differentiation and activation in vitro protocol using the gDE7 protein and other immunomodulatory components, such as cytokines and innate immune response agonists. The gDE7 protein is the result of the genetic fusion between the Herpes simplex virus-1 (HSV-1) glycoprotein D (gD) with the HPV-16 E7 oncoprotein and enables antigen targeting and activation of DCs. Following confirmation of the responsive effects of gDE7-sensitized BM-DCs, TC-1 C57BL/ 6 mice were challenged with tumor cells of the TC-1 strain and subsequently treated with 3 doses of gDE7-sensitized BM-DCs (1x106 / animal) in combination with poly (I:C) by the intravenous (i.v.) or subcutaneous (s.c.) route. Partial tumor growth control was observed in mouse groups immunized with gDE7-activated cells both in the presence or absence of poly (I:C). Administration of cells via the i.v. route resulted in enhanced anti-tumor effects with 80% tumor-free animals and increased numbers of activated CD8+ E7-specific T lymphocytes in peripheral blood and spleen. The treated animals showed enhanced IFN-γ production by effector memory T cells. In addition, immunotherapy based on this strategy promoted the influx of NKs cells into the spleen and conferred protection in a tumor relapse model generated following repeated tumor cell implants. These data support the development of a new immunotherapeutic approach to treat different HPV-induced tumors under clinical conditions.