Foram testados complexos de rutênio trans-[RuNO(NH₃)₄L](X)₃ (X = BF₄^- ou PF₆^- e L = imN, 4-pic, isn, py, pz, L - hist, nic, imC, P(OEt)₃, SO₃^-2) e [Ru(NO)Hedta)] como agentes antiproliferativos contra o parasito Leishamania major. Os complexos onde L = imN, pz, 4-pic, py, isn, e P(OEt)₃ exibem IC_50pro na faixa de 36 (L = imN) a 280μM (L= isn). A curva de crescimento das formas promastigotas, incubadas com os compostos mais promissores, trans-[RuNO(NH₃)₄L](BF₄)₃ (L= imN, pz, py, 4-pic), foi avaliada por meio de contagem de células viáveis e por ensaio colorimétrico (MTT). Uma relação entre os valores de k_-NO e efeito antipromastigota segue a seguinte ordem: imN>4-pic>pz>py. Foi observado um aumento na inibição do crescimento das formas promastigotas incubadas com o complexo trans-[RuNO(NH₃)₄P(OEt)₃](PF₆)₃ na presença de ácido ascórbico, confirmando o mecanismo de nitrosilação dos complexos utilizados. O complexo trans-[RuNO(NH₃)₄imN](BF₄)₃ e o sal de Angeli (Na₂N₂O₃) exibiram efeitos similares frente as formas amastigotas intracelulares. O composto trans-[RuNO(NH₃)₄imN](BF₄)₃ apresentou efeito antileishmania em experimentos in vivo. A reação entre trans-[RuNO(NH₃)₄L](X)₃ (X = BF₄^- or PF₆^- and L = imN, 4-pic, py, isn, P(OEt₃)) e excesso de L-cisteína foi investigada e os seus produtos analisados. HNO e NO⁰ foram encontrados como produtos da redução do ligante nitrosônio. Esta reação ocorre em varias etapas com a formação dos complexos trans-[Ru(NH₃)₄LN(O)SR]^n-1 e trans-[Ru(NH₃)₄LN(O)(SR)₂]^n-2 cujo as constantes de formação k₁ (1,7×10⁷ - 2,2×10⁴ mol^-1Ls^-1) e k₂ (3,3×10⁴ - 4,9×10¹mol^-1Ls^-1) foram calculados para L = P(OEt)3, 4-pic, py e isn). Estas espécies podem sofrer reações subseqüentes com dissociação de HNO e NO. Exceto para L = P(OEt₃), a reação não ocorre quando C_H⁺>= 1×10^-6 mol L^-1. Em solução onde C_H⁺ = 4×10⁸ mol L^-1, a reação ocorre principalmente segundo:

trans-[RuNO(NH₃)₄L]⁺³ + 2RS^- + H₂O → trans-[Ru(NH₃)₄L(H₂O)]²⁺ + RSSR + NO^-

Para L = P(OEt₃), e em meio ácido, NO⁰ é preferencialmente o produto da redução do ligante NO⁺:

trans-[RuNO(NH₃)₄P(OEt)₃]⁺³ + RSH + H₂O → trans-[Ru(NH₃)₄P(OEt)₃(H₂O)]²⁺ + ½ RSSR + NO⁰ + H⁺

Os resultados experimentais em solução sugerem que ambas as espécies NO e HNO podem ser responsáveis pelo efeito antiparasitário dos nitrosilos de rutênio aqui estudados. A relação entre a concentração das espécies NO/HNO será determinada pelas condições de pH do meio e concentração do redutor.

Ruthenium complexes type trans-[RuNO(NH₃)₄L](X)₃ (X = BF₄^- or PF₆^- and L = imN, 4-pic, isn, py, pz, L- hist, nic, imC, P(OEt)₃, SO₃^2-), and [RuNO(Hedta)] were tested as antiproliferative agents against the Leishmania major parasite. The complexes where L = imN, pz, 4-pic, py, isn, and P(OEt)₃ exhibited IC_50pro ranging from 36 for trans-[RuNO(NH₃)₄imN](BF₄)₃ to 280 μM for trans-[RuNO(NH₃)₄isn](BF₄)₃. The growth rate of the promastigote forms incubated with the most promising compounds, trans-[RuNO(NH₃)₄L](BF₄)₃ (L= imN, pz, py, 4-pic) had been evaluated trough motile cell counting and colorimetric assay (MTT). The trend between k_-NO values and the antipromastigote effect follows the order: imN>4-pic>pz>py. An increase on the inhibition of the promastigote forms growth by the trans-[RuNO(NH₃)₄P(OEt)₃](PF₆)₃ and trans-[RuNO(NH₃)₄imN](BF₄)₃ species was observed when the ruthenium complexes and ascorbic acid were simultaneously incubated, confirming the nitrosylation behavior of these complexes. Inhibitory effects of the trans-[RuNO(NH₃)₄imN](BF₄)₃ and of the Angeli's salt (Na₂N₂O₃) were similar on the intramacrophage amastigote form grown. Encouraged by the antileishmanial effect of the complex trans-[RuNO(NH₃)₄imN](BF₄)₃ observed in vitro, in vivo experiments were carried out in infected BALB/c mice. The reaction between trans-[RuNO(NH₃)₄L](X)₃ (X = BF₄^- or PF₆^- and L = imN, 4-pic, isn, P(OEt)₃) and excess of L-cysteine was investigated and the products analysed. HNO and NO are the products of nitrosonium ligand reduction. This reaction yields the complexes trans-[Ru(NH₃)₄LN(O)SR]^n-1 and trans-[Ru(NH₃)₄LN(O)(SR)₂]^n-2 which present k1 (1,7×10⁷ - 2,2×10⁴ mol^-1Ls^-1) and k2 (3,3×10⁴ - 4,9×10¹mol^-1Ls^-1) for L = P(OEt)3, 4-pic, py e isn). This species react with RS^- producing HNO and/or NO. Exception for L = P(OEt)₃, this reaction does not occurs when C_H⁺>= 1×10^-6 mol L^-1. For solution in which C_H⁺ = 4×10^-8 mol L^-1, the reaction occur mainly trough:

trans-[RuNO(NH₃)₄L]⁺³ + 2RS^- + H₂O → trans-[Ru(NH₃)₄L(H₂O)]²⁺ + RSSR + NO^-

For L = P(OEt)₃, and in acid media, NO⁰ is preferentially the reduction product of NO⁺ ligand.

trans-[RuNO(NH₃)₄P(OEt)₃]⁺³ + RSH + H₂O → trans-[Ru(NH₃)₄P(OEt)₃(H₂O)]²⁺ + ½RSSR + NO⁰ + H⁺

The experimental results from solution studies suggest that both NO and HNO could be responsible for the antiparasitaric effect of these ruthenium nitrosyl. The concentration ratio of NO/HNO could be dictated by the local conditions of pH.