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Disertación de Maestría
DOI
https://doi.org/10.11606/D.60.2022.tde-18072022-135419
Documento
Autor
Nombre completo
Camila Parizzi
Dirección Electrónica
Instituto/Escuela/Facultad
Área de Conocimiento
Fecha de Defensa
Publicación
Ribeirão Preto, 2022
Director
Tribunal
Cordeiro, Lorena Rigo Gaspar (Presidente)
Leonardi, Gislaine Ricci
Ambrosio, Sérgio Ricardo
Título en portugués
Avaliação do potencial fotoprotetor de fungos marinhos isolados do continente Antártico
Palabras clave en portugués
Antioxidante
Fotoproteção
Fototoxicidade
Fungos
Geomyces vinaceus
Métodos in vitro
Rhinocladiella similis
Resumen en portugués
A exposição à radiação solar pode provocar efeitos indesejáveis, como o fotoenvelhecimento cutâneo e câncer de pele. Desta forma é recomendado o emprego de medidas de fotoproteção. A busca de novas substâncias com capacidade fotoprotetora de origem natural nos leva a prospectar princípios ativos a partir de ambientes extremos com alto índice de radiação. Este é o caso do continente Antártico, habitado por organismos capazes de resistir aos danos causados pela alta incidência de radiação solar. Para este estudo foram selecionadas duas espécies de fungos do continente antártico: Geomyces vinaceus, coletado de sedimentos de água de fumarola, e Rhinocladiella similis, isolado da alga parda Phaeurus antarcticus, com objetivo de analisar o potencial fotoprotetor e antioxidante de seus extratos. Para isso foram avaliadas diferentes condições de cultivo dos fungos variando meio de cultura e tempo de incubação para selecionar extratos mais promissores. Foi realizado fracionamento e subfracionamento dos extratos pelas técnicas de cromatografia líquida a vácuo e em camada delgada. Para análise do potencial fotoprotetor foram obtidos os espectros de absorção na região UV das amostras, bem como análise da fotoestabilidade perante exposição à radiação UVA. A atividade antioxidante foi analisada pelo método de neutralização do radical DPPH e pela detecção da geração de ERO intracelular induzida por radiação UVA em monocamada celular (HaCaT). Também foram analisadas a fototoxicidade baseada no guia 432 da OECD em monocamada celular de fibroblastos murinos e a irritação ocular pelo método HET-CAM. Os extratos brutos extraídos com acetato de etila dos fungos cultivados em arroz, suas frações e subfrações, mostraram alta absorção na região do UVA e UVB, entretanto foram consideradas fotoinstáveis perante a dose de radiação utilizada. Os extratos brutos, frações e subfrações do fungo R. similis cultivado em 14 e 28 dias também apresentaram potencial cito e fototóxico, contudo as frações testadas pelo ensaio de HET-CAM não apresentaram potencial irritante. Frações do fungo R. similis cultivado em 28 dias apresentaram boa atividade de neutralização do DPPH e frações de R. similis cultivado em 14 dias apresentaram redução da produção de ERO induzidos pelo UVA em até 22% em baixas concentrações (<25 µg/mL). O estudo realizado contribuiu para indicar possíveis aplicações de frações e substâncias isoladas dos fungos endofíticos estudados. Entretanto são necessários estudos complementares para a confirmar da ausência de toxicidade, avaliar e identificar quais são as substâncias responsáveis pela cito e fototoxicidade e quais são as de interesse para a fotoproteção.
Título en inglés
Evaluation of photoprotective potential of marine fungi isolated from Antarctic continent
Palabras clave en inglés
Antioxidant
Fungi
Geomyces vinaceus
In vitro methods
Photoprotection
Phototoxicity
Rhinocladiella similis
Resumen en inglés
Exposure to solar radiation can cause unwanted effects, such as photoaging and skin cancer. Thus, different photoprotective approaches are important. The search for new compounds of natural origin with photoprotective potential lead to prospect extreme environments with high radiation levels. This is the case of Antarctic continent, inhabited by organisms capable of protect themselves from UV induced damages. In this study we selected two species of fungi from the Antarctic continent: Geomyces vinaceus, collected from fumarole sediments, and Rhinocladiella similis, isolated from brown algae Phaeurus antarticus, aiming to evaluate the photoprotective potential and antioxidant activity of their extracts. Different cultivation conditions were tested altering culture medium and incubation time to obtain most promising extracts. The extracts were fractionated and subfractionated by vacuum liquid chromatography and thin layer chromatography. Photoprotection was assessed by obtaining the UV absorption spectra and determination of photostability with exposure to UVA radiation. Antioxidant activity was assessed by DPPH radical scavenging and detection of intracellular ROS induced by UVA radiation in cell monolayer (HaCaT). Photoxicity was evaluated by OECD 432 guidelines in mouse fibroblast cell monolayer assay, and ocular irritation was assessed by the HET-CAM assay. The crude extracts of ethyl acetate of fungi cultivated in rice, its fractions and subfractions presented high UVA and UVB absorption, however were considered photounstable under the radiation dose employed. The crude extract, fractions and subfractions of R. similis cultivated for 14 and 28 days also presented cyto and phototoxic potential, although fractions tested by the HET-CAM assay did not present any irritation potential. Fractions of R. similis cultivated for 28 days presented good scavenging activity of DPPH radical and fractions of R. similis cultivated for 14 days decreased of ROS production induced by UVA up to 22% in lower concentrations (<25 µg/mL). This study contributed to indicate possible applications of fractions and substances isolated from the studied endophytic fungi. However, further studies are needed to confirm the absence of toxicity, evaluate and identify which substances are responsible for cytotoxicity and phototoxicity and which are of interest for photoprotection
 
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Fecha de Liberación
2024-05-19
Fecha de Publicación
2022-08-03
 
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