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Tese de Doutorado
DOI
https://doi.org/10.11606/T.60.2022.tde-25082023-140252
Documento
Autor
Nome completo
Nayna Cândida Gomes
E-mail
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
Ribeirão Preto, 2022
Orientador
Banca examinadora
Martinis, Bruno Spinosa de (Presidente)
Malfará, Wilson Roberto
Silva, Ricardo Henrique Alves da
Velho, Jesus Antonio
Título em português
Suor e fluido oral: alternativas para a investigação das drogas de abuso
Palavras-chave em português
DPX
Drogas de abuso
Fluido oral
GC-MS
Suor
Resumo em português
Nos últimos anos, o desenvolvimento de métodos para determinação de substâncias psicoativas em matrizes biológicas convencionais e alternativas tem sido motivo de vários estudos. Entre as amostras alternativas, tanto o suor como o fluido oral têm se mostrado matrizes úteis na Toxicologia Clínica e Forense. No suor, uma das principais vantagens reside na possibilidade do monitoramento do uso de tais substâncias, como por exemplo de pessoas internadas em clínicas de reabilitação e no sistema prisional. No fluido oral, os resultados compatíveis com os obtidos para amostras de sangue, representam a versatilidade desta matriz alternativa. O objetivo deste estudo foi desenvolver, otimizar, validar e aplicar métodos de análises de anfetamina, metanfetamina, MDMA, MDA, MDEA, cocaína, cocaetileno, canabidiol, Δ9-tetrahidrocanabinol, dibutilona, n-etilpentilona, 25E-NBOMe, 25C-NBOMe, 2C-C, 2C-E, fentanil e carfentanil em amostras de suor e fluido oral. Tais métodos envolvem as amostragens de suor utilizando adesivos de coleta desenvolvidos no laboratório e extrações utilizando ponteiras descartáveis DPX-SCX e DPX-WAX. A separação, identificação e quantificação dos analitos foi realizada utilizando a cromatografia em fase gasosa acoplada à espectrometria de massas. Como resultados obtidos da validação, o limite de quantificação, para a matriz do suor, variou de 2 a 30 ng/adesivos, já no fluido oral este variou de 4 a 60 ng.mL-1. A curva de calibração foi linear e a concentração variou de 2 a 1100 ng/adesivo e de 4 a 2200 ng. mL-1. A recuperação variou de 72,4% a 97,1% em amostra de suor e de 71,3% a 98,8% em fluido oral. Em ambas as matrizes biológicas os analitos foram estáveis. O adesivo desenvolvido é de fácil preparação, custo baixo, e se mostrou eficiente na amostragem de suor para as análises das substâncias psicoativas. Após o desenvolvimento e validação do método, amostras de suor e fluido oral foram coletadas de 95 voluntários, usuários de drogas, no Centro de Atenção Psicossocial Álcool e Drogas II de Ribeirão Preto. Resultados mostraram que não foram detectadas novas substâncias psicoativas tais como dibutilona, n-etilanfetamina, 25E-NBOMe, 25C-NBOMe, 2C-C, 2C-E, carfentanil e fentanil, assim como a anfetamina, metanfetamina, MDEA e canabidiol. No entanto, a cocaína, cocaetileno e o éster-metilanidroecgonina foram detectados e quantificados. Sendo assim, foi verificado que tanto a cocaína quanto o cocaetileno, o éster metilanidroecgonina e estavam presentes nas amostras com maiores valores médios de concentrações no suor (M=136; 44; 57 ng/adesivo, respectivamente), quando comparado ao fluido oral (amostra "A": M=59; 39; 26 ng.mL -1 e amostra "B": 51; 51; 44 ng.mL-1). Quanto ao Δ9-tetrahidrocanabinol esses valores de concentração foram maiores nas amostras de fluido oral ("A": M=342 ng.mL-1 ; "B": M=443 ng.mL-1). Após a quantificação destes analitos foi realizada a análise de componentes principais em que foi possível verificar que a amostra de suor é a melhor alternativa de escolha para o monitoramento do uso de drogas, isso é favorecido devido a forma de coleta, sendo esta de forma cumulativa no adesivo. Pode-se concluir que os métodos desenvolvidos, otimizados e validados mostraram-se eficazes, pois foi possível realizar a quantificação os analitos no suor e no fluido oral. Neste estudo, foi observado que não só a amostra de suor, mas como também a de fluido oral são alternativas nas análises de drogas de abuso.
Título em inglês
Sweat and oral fluid: alternatives for the investigation of drugs of abuse
Palavras-chave em inglês
DPX
Drugs of abuse
GC-MS
Oral fluid
Sweat
Resumo em inglês
In recent years, the development of methods for the determination of psychoactive substances in conventional and alternative biological matrices has been the subject of several studies. Among the alternative samples, both sweat and oral fluid have displayed applications in Clinical and Forensic Toxicology. In sweat, one of the main advantages lies in the possibility of drug monitoring, e.g., aiming at patients in rehabilitation clinics and individuals on parole. Regarding oral fluid, substance measurements compatible with blood levels demonstrate the versatility of this alternative matrix. The present study aimed to develop, optimize, validate and apply methods of analysis of amphetamine, methamphetamine, MDMA, MDA, MDEA, cocaine, cocaethylene, cannabidiol, Δ9-tetrahydrocannabinol, dibutylone, n-ethylpentylone, 25E-NBOMe, 25CNBOMe, 2C-C, 2C-E, fentanyl and carfentanyl in sweat and oral fluid samples. Such methods involve sweat sampling using collection patches developed in the laboratory and extraction using DPX-SCX and DPX-WAX disposable tips. The separation, identification and quantification of analytes were performed using gas chromatography coupled with mass spectrometry. As results of method validation, obtained limits of quantification ranged from 2 to 30 ng.mL-1 in sweat, and from 4 to 60 ng.mL-1 in oral fluid. Prepared calibration curves displayed linearity for concentrations ranging from 2 to 1100 ng/patch, and from 4 to 2200 ng. mL-1 . Recovery ranged from 72.4% to 97.1% in sweat samples, and from 71.3% to 98.8% in oral fluid. The analytes showed adequate stability in both biological matrices. The developed adhesive presented low cost and easy preparation. Additionally, the prepared device proved to be efficient in sampling sweat for the analysis of psychoactive substance. Once method development and validation were concluded, samples of sweat and oral fluid were collected from 95 volunteers with drug addiction problem, at the Psychosocial Care Center for Alcohol and Drugs II in Ribeirão Preto. New psychoactive substances, such as dibutylone, n-ethylamphetamine, 25E-NBOMe, 25C-NBOMe, 2C-C, 2C-E, carfentanyl and fentanyl, as well as amphetamine, methamphetamine, MDEA and cannabidiol were not detected in the analyzed samples. On the other hand, cocaine, cocaethylene, anhydroecgonine methyl ester and Δ9-tetrahydrocannabinol could be detected and quantified. Average concentrations of cocaine, cocaethylene and anhydroecgonine methyl ester were higher in sweat (M=136; 44; 57 ng/patch, respectively) than in oral fluid (sample "A": M=59; 39; 26 ng.mL-1 and sample "B": 51; 51; 44 ng.mL-1). In relation to Δ9-tetrahydrocannabinol, obtained concentration values were higher in oral fluid samples ("A": M=342 ng.mL-1 ; "B": M=443 ng.mL-1). Based on quantification data, principal component analysis was performed. The obtained results indicated that sweat sample may be the most suitable for drug monitoring. This matrix is particularly convenient due to its form of collection, which allows to retrieve a cumulative record of substances. It can be concluded that the developed, optimized and validated methods were appropriate, allowing to quantify the analytes in sweat and oral fluid. The present study demonstrated that not only sweat, but also oral fluid, are promising alternatives matrices for the analysis of drugs of abuse.
 
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Data de Liberação
2024-09-26
Data de Publicação
2023-09-18
 
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