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Mémoire de Maîtrise
DOI
https://doi.org/10.11606/D.60.1992.tde-22052023-161349
Document
Auteur
Nom complet
Solange Cristina da Silva
Adresse Mail
Unité de l'USP
Domain de Connaissance
Date de Soutenance
Editeur
Ribeirão Preto, 1992
Directeur
Jury
Sarti, Silvio Jose (Président)
Ito, Izabel Yoko
Moreira, Eduardo Augusto
Titre en portugais
Avaliação da atividade antimicrobiana in vitro de algumas espécies de Ipomoea
Mots-clés en portugais
Atividade antimicrobiana
Ipomoea
Resumé en portugais
Foi realizada a triagem da atividade antimicrobiana in vitro dos extratos brutos de Ipomoea cairica, Ipomoea pes-caprae, Ipomoea phyllomega pelo método de difusão em ágar pelas técnicas de cavidade-placa e disco-placa. Estas espécies de Convolvulaceae, utilizadas na medicina popular nordestina, foram ensaiadas contra Staphylococcus aureus e Micrococcus luteus, selecionados como microrganismos indicadores. Após esta triagem, elegemos a Ipomoea cairica para a continuação do estudo da atividade antimicrobiana. As partes aéreas da referida espécie foram coletadas em setembro de 1990, nos arredores da cidade de Ribeirão Preto, estado de São Paulo, secas e pulverizadas, e extraídas por percolação com acetato de etila. O extrato bruto, assim obtido, foi submetido a fracionamento cromatográfico e isolou-se 2 substâncias codificadas como SP-1 e SP-2. A ação antimicrobiana destes produtos foi avaliada pelo método de difusão em ágar, utilizando-se Antibiotic medium nº 1 (pH 6,6), como meio de cultura, pela técnica de cavidade-placa em camada dupla como preconizado por GROVE & RANDALL (1955). Selecionou-se Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Micrococcus luteus e Escherichia coli como microrganismos indicadores, com uma suspensão de inóculo de 10^6 a 10^7 UFC/ml, padronizada pela metade da escala de MacFarland. Foram confeccionados poços de 6,0mm de diâmetro e adicionados 50,0ul das amostras solubilizadas em DMSO/H2O (1:1) para obter uma concentração de 15,0mg/ml. Foi atribuído o sinal positivo (+), quando as amostras apresentavam halo de inibição ao redor dos poços, e sinal negativo (-), quando não apresentavam halo de inibição. Para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM), foi utilizado o método da diluição em ágar AM nº1 frente a 25 microrganismos, semeados através de multiaplicador de Steer, na superfície do ágar, em forma de pontos. O extrato acetatoetílico e frações cromatográficas dele obtidas foram testadas nas concentrações de 20,0; 10,0; 5,0; 2,5; e 1,25mg/ml. As substâncias SP-1 e SP-2 isoladas das frações foram testadas nas concentrações de 1.000,0; 500,0; 250,0; 125,0; e 62,5ug/ml. A menor concentração capaz de inibir o crescimento microbiano foi considerada a CIM. Verificou-se que a atividade antimicrobiana era PH dependente, ou seja, a atividade dos extratos, frações e substâncias SP-1 e SP-2 só foi evidenciada quando utilizou-se um meio de cultura com pH em torno de 6,6. Os extratos e frações de Ipomoea cairica foram ativos tanto para bactérias Gram-positivas, quanto para as Gram-negativas, quando utilizou-se o método de difusão em ágar pela técnica de cavidade - placa. A CIM dos extratos e frações foi de 1,0mg/ml para Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidennidis, Micrococcus luteus, Enterobacter da saliva, Pseudomonas aeruginosa de canal, Candida albicans da pele, Candida parapsilosis, Candida guilliermondii, Rhodotorulla e Candida krusei, e de 60,0ug/ml para as substâncias SP-1 e SP-2 contra Microccus luteus, Enterobacter da saliva, Candida parapsilosis, Candida guilliermondii e Rhodotorulla.
Titre en anglais
Evaluation of the in vitro antimicrobial activity of some species of Ipomoea
Mots-clés en anglais
Antimicrobial activity
Ipomoea
Resumé en anglais
The antimicrobial activity of crucie extracts of Ipomoea cairica, Ipomoea pes-caprae and Ipomoea phyllomega was tested in vitro on Staphylococcus aureus and Micrococcus luteus used as indicator microorganisms, employing agar gel immunodiffusion by the well-plate and disk-plate techniques. Some species of Convolvulaceae were used in folkloric medicine. After microbiological screening, Ipomoea cairica was selected for the study of antimicrobial activity. The aerial parts of I. cairica were colleted in September 1990 from the surroundings of Ribeirão Preto, a city located in the northern part of the State of São Paulo. The material was dried and pulverized and extracted by percolation using ethyl acetate as solvent. The crude extract thus obtained was chromatographed and two substances names SP-1 and SP-2 were obtained. The antimicrobial action of these substances was evaluated by agar diffusion using Antibiotic Médium nº 1, pH 6.6, as culture médium. The substances were tested against Staphylococcus aureus, Sthapylococcus epidermidis, Micrococcus luteus and Escherichia coli used as indicator microorganisms in an inoculum suspension of 10^6 to 10^7 CFU/ml standardized by half the MacFarland scale, employing the double-layer well-plate technique recommended by GROVE & RANDALL (1955). Wells measuring 6mm in diameter were prepared and 50.0ul of the samples were added after solubilization in DMSO/H2O (1:1) in order to obtain a concentration of 15.0mg/ml. A positive sign was assigned when the samples presented an inhibition halo around the wells, and a negative sign was assigned when the halo was not present. Minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by dilution on AM n° 1 agar in the presence of microorganisms inoculated onto the agar surface as points using a Steer multiapplicator. The ethyl acetate crude extract and the chromatographic fractions were tested at concentrations of 20.0, 10.0, 5.0, 2.5 and 1.25mg/ml, and substances SP-1 an SP-2 at concentrations of 1000.0, 500.0, 250.0, 125.0 and 62,5ug/ml, and the lowest concentration capable of inhibiting microbial growth was considered to be the MIC. The antimicrobial activity was found to be pH dependent, i.e., the activity of extracts, fractions and substances SP-1 an SP-2 was detected only when the culture medium was used at pH 6,6 I. cairica extracts and fractions were active against both Gram-positive and Gram-negative bacteria when agar diffusion was used by the well-plate technique. The MIC of extracts and fractions was 1.0mg/ml against Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Micrococcus luteus, saliva Enterobacter, canal Pseudomonas aeruginosa, skin Candida albicans, Candida parapsilopsis, Candida quillieraondii, Rhodotorulla and Candida krusei, and the MIC of substances SP-1 and SP-2 was 60,0ug/ml against Micrococcus luteus, saliva Enterobacter, Candida quilliennondii Candida quilliermondii and Rhodotorulla.
 
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Date de Publication
2023-05-22
 
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