Introdução - Vibrio parahaemolyticus é uma espécie de ambiente marinho, responsável por gastrenterite humana e associada a diversos surtos, epidemias e pandemias. As gastrenterites estão relacionadas às cepas produtoras de hemolisina termoestável direta (TDH) e hemolisina análoga à termoestável (TRH), consideradas os principais fatores de virulência da espécie. Objetivos - estudar a viabilidade dos métodos moleculares para confirmar a identificação das cepas de V. parahaemolyticus; conhecer a distribuição dos genes relacionados à virulência (tdh, trh), e do gene tl; e conhecer a diversidade genotípica entre os isolados. Material e Métodos - 52 cepas ambientais de Vibrio parahaemo/yticus do Brasil foram analisadas. Para confirmar a identificação das espécies e pesquisar a presença dos genes tdh, trh e tl, os isolados foram submetidos a análises moleculares pela PCR, com primers específicos. A diversidade genotípica foi analisada pela técnica de PFGE, e a extração plasmidial seguida de eletroforese também foi realizada. Resultados - A identificação de todas as 52 cepas foi confirmada pela PCR como sendo V. parahaemolyticus. O gene tl estave presente nos 52 (100%) isolados, o gene tdh foi identificado em 2 (3,8%) deles, enquanto que o gene trh, não foi detectado em nenhuma das cepas estudadas. Conclusões - A freqüente presença do gene tl pode indicá-lo como um marcador para a detecção do agente. A baixa detecção do gene tdh em cepas ambientais é comum de acordo com a literatura. Este estudo revela a efetividade da PCR na confirmação taxonômica da espécie e na detecção de genes de virulência. A análise dos perfis moleculares possibilitou a observação da diversidade genotípica entre os isolados, nos quais também foi possível observar a presença de plasmídios. As técnicas moleculares mostraram ser um importante instrumento no campo da saúde pública, podendo auxiliar no monitoramento do patógeno no meio ambiente, contribuindo com as autoridades sanitárias.

lntroduction - Vibrio parahaemolyticus is a species from marine environment, responsible for human gastroenteritis and associated to severa! outbreaks, epidemies and pandemies. Gastroenteritis are related to strains producing thermostable direct hemolysin (TDH) and thermostable direct hemolysin-related (TRH), considered the main virulence factors of the species. Objectives - to study the viability of molecular methods to confirm the identification of isolates of V. parahaemolyticus; to know the distribution of genes related to virulence (tdh, trh), and of the gene tl; and to know the genetic diversity among isolates. Material and Methods - Fifty-two (52) environmental V. parahaemolyticus strains from Brazil were analyzed. To confirm species identification and search for the presence of genes tdh, trh and tl, the isolates were submitted to molecular analysis by PCR with specific primers. The genetic diversity was analyzed by PFGE technique, and the plasmid extraction followed by electrophoresis was also carried out. Results - The identification of the 52 isolates was confirmed by PCR as V. parahaemolyticus. The tl gene was present in 52 (100%) isolates, tdh gene was identified in 2 (3,8%) of them, while trh gene was not detected in any studied strain. Conclusions - The frequent presence of tl gene can indicate it as a marker for the microorganism detection. The low detection of tdh gene in environmental strains is a common finding according the literature. This study reveals an effectiveness of PCR in the taxonomic confirmation of the species and in the virulence genes detection. The fingerprinting analysis of isolates it made possible to observe the genetic diversity among isolates, in which it was also possible to observe the presence of plasmids. Molecular techniques showed to be an important tool in the public health field, once they can help in the pathogen monitoring in the environment, contributing to the sanitary authorities.