Objetivo. No Estado de Mato Grosso do Sul (MS), como em outros estados brasileiros, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) e a leishmaniose visceral americana (LVA) apresentam ampla distribuição geográfica. Estudos entomológicos e epidemiológicos realizados no Assentamento Guaicurus, município de Bonito, MS identificaram a presença de vetores de leishmanioses e a ocorrência de casos humanos de LTA e casos de LVA em cães. O presente trabalho, inserido em um projeto mais amplo que dá continuidade a esses estudos, teve por objetivo identificar a infecção natural por Leishmania em animais domésticos e vetores e ampliar o conhecimento sobre o comportamento da fauna flebotomínea, em ecossistemas do Assentamento Guaicurus e analisar esses encontros à luz dos fatores ambientais. Métodos. Foram examinados 53 eqüinos e 129 cães, dos quais se obtiveram amostras de sangue para a realização da reação de imunofluorescência indireta. As amostras de cães também foram submetidas ao ensaio imunoenzimático. Dos animais reagentes, foram colhidas amostras de aspirado medular para confecção de lâminas, tentativa de isolamento em meio de cultura, inoculação em hamster e realização da reação em cadeia da polimerase (PCR). Nesta última, também foram utilizadas amostras de creme leucocitário destes animais. A fauna flebotomínea foi pesquisada no período de outubro de 2002 a outubro de 2003, realizando-se capturas quinzenais com armadilhas automáticas luminosas dotadas de inseticidas, instaladas em 25 pontos, distribuídos em áreas de mata, de cultivo, peridomiciliares e intradomiciliares e em uma gruta. Para a obtenção de fêmeas a serem dissecadas para a investigação da infecção natural por flagelados, mensalmente, eram feitas capturas com armadilhas de Shannon por dois ou três dias consecutivos, das 18h:00 às 22h:00 em alguns dos peridomicílios e foram instaladas armadilhas automáticas luminosas, sem inseticida, em vários ambientes do Assentamento Guaicurus. As fêmeas dissecadas, após identificação do flebotomíneo e investigação de flagelados sob microscopia, foram mantidas em álcool 70%. Posteriormente, essas fêmeas foram submetidas à PCR para detecção de DNA do parasita e sua identificação por seqüenciamento. Resultados. Todos os eqüinos pesquisados apresentaram-se não reagentes. Entre os cães foi observado pela reação de imunofluorescência indireta, uma soro-prevalência de 15,5% (20/129) e 31,0% (40/129) pelo ensaio imunoenzimático. Dentre os cães reagentes, foi possível colher nova amostra de sangue de 28 animais e aspirado de medula óssea de 24, sendo encontrados cães infectados por Leishmania (Leishmania) chagasi, Leishmania (Viannia) sp e Leishmania (L.) amazonensis. Em relação à fauna de flebotomíneos, foram capturados 19538 espécimes pertencentes a 15 espécies. Nas capturas quinzenais com armadilhas automáticas luminosas, com exceção da gruta, único ambiente onde Lutzomyia longipalpis não foi capturada e Lutzomyia almerioi predominou absolutamente, a primeira teve as suas freqüências mais elevadas em todos os ambientes, em ordem decrescente, mata, ambiente de cultivo, peridomicílio e intradomicílio, sempre seguida de Lu. almerioi e Nyssomyia whitmani. Lu. longipalpis e Ny. whitmani apresentaram densidades mais elevadas no verão e em julho e Lu. almerioi somente no verão. Entre as 1395 fêmeas dissecadas, foram observadas ao microscópio, três de Lu. almerioi infectadas por flagelados. Pools de fêmeas dissecadas de Lu. almerioi, Lu. longipalpis e Ny. whitmani foram pesquisados por PCR, com 15 amostras positivas. Detectou-se a presença de DNA das três Leishmania, acima descritas em Lu. longipalpis e de Leishmania (L.) chagasi e de Leishmania (Viannia) sp em fêmeas de Lu. almerioi. Conclusões. A presença de cães e de fêmeas de flebotomíneos infectadas por L. (L.) chagasi, L. (L.) amazonensis e L. (Viannia) sp, são indicativos da transmissão de ambas as formas de leishmaniose, LTA e LVA na população canina, no Assentamento Guaicurus. Possivelmente, Lu. longipalpis e Lu. almerioi atuem como vetoras, sendo o verão o período de maior risco para a transmissão, em virtude das densidades mais elevadas observadas nesta estação.

Objective. In Mato Grosso do Sul State, as in other Brazilian States, American cutaneous leishmaniasis (ACL) and American Visceral leishmaniasis (AVL) are widespread. Entomological and epidemiological studies undertaken in the Guaicurus Settlement, Bonito county, have identified the presence of vectors and human cutaneous leishmaniasis and canine visceral leishmaniasis. This present project continuous those studies and has as its objectives the identification of natural infection by Leishmania in domestic animals and sand fly vectors, enhancement of our knowledge of the sand fly fauna of the ecosystems of the Guaicurus Settlement and analysis of the epidemiology of these parasite diseases in the light of the factors under investigation. Methods. Samples of blood were obtained from horses and dogs for analysis by the indirect immunofluorescent antibody test (IFAT). The dog samples were also submitted to the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Of the reagent dogs, samples of bone marrow aspirate were obtained for the preparation of slides, isolation in a culture medium, inoculation in hamsters and testing by the polymerase chain reaction (PCR). In this last, samples of the buffy coat of the animals were also used. The phlebotomine fauna was studied during the period from October 2002 to October 2003. Captures were undertaken fortnightly, with automatic light traps with insecticide in 25 points distributed in forested and cultivated areas, peridomiciliary and intradomiciliary environments and in a cave. Monthly captures were carried out with Shannon traps installed in some of the peridomiciles and automatic light traps, without insecticide, in severaI environments of the Guaicurus settlement for the investigation of natural infection by flagellates in sand fly females. The dissected females, after examined under the microscope to search for flagellates and identification of the phlebotomine, were conserved in alcohol 70% and submitted to the PCR to detect the presence of parasite DNA and identify it by sequencing. Results. None of the horses was reagent. For the dogs observed by IFAT, a seroprevalence of 15.5% (20/129) and 31,0% (40/129) was found by ELISA. Among the reagent dogs, a further sample of blood was taken from 28 animals and bone marrow aspirate from 24 of these, among the dogs some were found to be infected by Leishmania (Leishmania) chagasi, Leishmania (Viannia) sp and Leishmania (L.) amazonensis. As regards the phlebotomine fauna, 19,538 specimens belonging to 15 species were captured. In fortnightly captures with automatic light trap, except in the cave, the only environment in which no Lutzomyia longipalpis was captured and Lutzomyia almerioi predominated overwhelmingly, the former had higher frequencies in all the environments sampled, in decreasing order: forest, the cultivate areas, peridomicile and intradomicile, always followed by Lu. almerioi and Nyssomyia whitmani. Lu. longipalpis and Ny. whitmani present high densities during summer and in July and Lu. almerioi; only in the summer. Of the 1,395 females dissected, three Lu. almerioi were found under the microscope to be infected by flagellates. Pools of dissected females of Lu. almerioi, Lu. longipalpis and Ny. whitmani were investigated by PCR, presenting 15 positive samples. The presence of the DNA of the three above mentioned Leishmania was detected in Lu. longipalpis and Leishmania (L.) chagasi and Leishmania (Viannia) sp in females of Lu. almerioi. Conclusions. The presence of dogs and phlebotomine females infected by L. (L.) chagasi, L. (L.) amazonensis and L. (Viannia) sp, indicates the transmission of both forms of leishmaniasis, ACL and AVL, in the canine population of the Guaicurus Settlement. Lu. longipalpis and Lu. almerioi possibly, act as vectors, summer being the periods of greatest of risk of transmission, in view of the higher densities presented in that season.