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Master's Dissertation
DOI
https://doi.org/10.11606/D.6.2003.tde-01122023-133540
Document
Author
Full name
Ana Maria Marassa
Institute/School/College
Knowledge Area
Date of Defense
Published
São Paulo, 2003
Supervisor
Committee
Galati, Eunice Aparecida Bianchi (President)
Gomes, Almério de Castro
Silva, Ana Maria Moura da
Title in Portuguese
Padronização da técnica imunoenzimática (ELISA) de captura para o estudo do hábito alimentar de Dípteros da subfamília Phlebotominae
Keywords in Portuguese
Identificação de Sangue Ingerido
Lutzomyia Longipalpis
Phlebotominae
Técnica Imunoenzimática (ELISA) de Captura
Vetores
Abstract in Portuguese
A identificação de sangue ingerido pelos insetos constitui-se em importante parâmetro para elucidar aspectos ligados à transmissão de zoonoses, dentre elas, as leishmanioses. Dentre alguns métodos empregados para esclarecer a atração de vetores por animais que possam atuar como reservatórios dessas parasitoses, destacam-se os métodos sorológicos. O presente estudo teve como objetivo, padronizar a técnica imunoenzimática (ELISA) de captura, a ser utilizada em pesquisas relacionadas à atração de vetores das leishmanioses. Para a padronização da técnica, foram utilizadas fêmeas de flebotomíneos ingurgitadas da espécie Lutzomyia longipalpis, criadas em laboratório em temperatura ambiente de 25 ± 2°C, alimentadas experimentalmente em rato e com a utilização de reagentes disponíveis no comércio. Em vista da alta sensibilidade, favorecida pelo sistema avidina-biotina, quantificou-se sangue ingerido para amostras com diferentes períodos de digestão, utilizando-se a menor concentração de anti-soro. A técnica pôde prover a realização de pelo menos noventa testes em duplicata para a determinação de sangue recém-ingerido. Para todas as amostras com períodos de 12 e 24 horas pós-ingestão, foi constatada a presença de sangue, observando-se diferença significativa entre os respectivos títulos, com a possibilidade de detecção de sangue até 48 horas e observada a ausência total de reação após 72 horas da ingestão de sangue.
Title in English
Standardizing a enzime-linked immunossorbent assay (ELISA) to be employed in studies related to food habits of Diptera
Keywords in English
Blood Meal Identification
Lutzomyia longipalpis
Phlebotominae
Sandwich Enzime-Linked Immunossorbent Assay (ELISA)
Vectors
Abstract in English
Blood meals taken by insects constitute an important parameter for the elucidation of aspects of the transmission of the zoonoses, and among them, the Leishmaniases. Among the methods used in the investigation of the attraction of those animals, wich may be hosts of these parasitoses, exercised over vectors, are the immunological assays. This study was undertaken for the purpose of standardizing a sandwich enzime-linked immunossorbent assay (ELISA) to be employed in research projects related to leishmaniases vectors attraction to animals. Laboratory-bred sandflies, Lutzomyia longipalpis, maintained at 25± 2°C, and comercial reagents, were employed. fed on rats and In the light of the high sensibility that the biotin-avidin method permits, samples with different time periods of digestion were quantified, by means of the smallest concentration of antisera. The technique provided at least ninety repeat tests to determine recent blood meals taken by these insects. Blood meals were detectable up to 12 and 24h after feeding, and a significant difference between these titles was observed, with the possibility of detecting blood meals up to 48h after ingestion and the total absence of reaction 72 h thereafter.
 
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Publishing Date
2023-12-04
 
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