O Carcinoma espinocelular (CEC) de cabeça e pescoço é uma malignidade de alta incidência e mortalidade devido a resistência das células-tronco tumorais (CTT) aos tratamentos antineoplásicos. NFkB é um fator de transcrição associado a quimiorresistência por ativar genes importantes na carcinogênese. O objetivo deste trabalho foi avaliar o papel de NFkB no acúmulo de CTT em linhagens celulares de CEC de língua resistentes a Cisplatina e se a inibição da via de NFkB poderia reverter o fenótipo de quimiorresistência. Foram realizados ensaios in vitro com as linhagens celulares CAL-27 e SCC-9 selvagens a resistentes a Cisplatina (CisR). TNFα foi usado como indutor e CBL0137 e Emetine como inibidores de NFkB. Foi identificado acúmulo de NFkB nas células CisR e na população de CTT; ainda, as células selvagens com TNFα e CisR apresentaram aumento de CTT, sugerindo o envolvimento de NFkB no acumulo destas células. A administração de CBL0137 diminuiu a expressão de NFkB na CAL-27 e de CXCL8 e TNF em ambas linhagens. Emetine reduziu a expressão de NFkB na SCC-9. Os inibidores reduziram a expressão proteica de p-NFkB em ambas linhagens e causaram aumento de expressão gênica de HDAC1, 2, 9 e SIRT 1 na CAL-27 e de HDAC9 e SIRT1 na SCC-9. A administração de CBL0137 aumentou a expressão gênica de HDAC1 e HDAC11 na SCC-9. Os tratamentos reduziram os níveis de acetilação das histonas H3K9, H3K36, H3K79, H4K5 e H4K12 na CAL-27 e de H3K79, H4K5 e H4K12 na SCC9; ainda, CBL0137 reduziu H3K36 na SCC9. O tratamento de ambos inibidores combinados com Cisplatina e a monoterapia com Emetine foram capazes de reduzir o número de CTT na CAL-27 enquanto o tratamento isolado CBL0137 ou combinado com Cisplatina foram mais eficientes na SCC9. O tratamento isolado com Emetine foi mais eficiente em reduzir as CTT em ambas linhagens. Ambas drogas inibiram o potencial de formação de colônias e Emetine + Cisplatina e Emetine reduziram o número de células invasivas na CAL-27 e SCC-9, respectivamente. Emetine + Cisplatina foi o tratamento mais eficiente na inibição do potencial de migração. Com os resultados obtidos, é sugerido que NFkB está envolvido no acúmulo de CTT em linhagens celulares resistentes à cisplatina e que a sua inibição induz a sensibilização ao tratamento, reduzindo a população de CTT e marcadores de agressividade tumoral.

Head and neck squamous cell carcinoma is a high mortality and malignancy disease due to cancer stem cell (CSC) resistance to antineoplastic treatments. NFkB is a transcription factor associated with chemoresistance through activation of importante genes in carcinogenesis. The objective of this study was to evaluate the role of NFkB in the accumulation of CSC in Cisplatin-resistant tongue squamous cell carcinoma cell lines and whether inhibition of the NFkB pathway could reverse the phenomenon of chemoresistance to this drug. In vitro assays were performed with the wild-type CAL-27 and SCC-9 cell lines resistant to Cisplatin (CisR). TNFα was used as an inducer and CBL0137 and Emetine as NFkB inhibitors. An accumulation of NFkB was found in CisR cells and in the CTT + population; further, wild-type cells with TNFα and CisR additionally increased CTT, suggesting involvement of NFkB in accumulating these cells. As IC50 and drug inhibition doses for each strain were established. Administration of CBL0137 decreased NFkB expression in CAL-27 and CXCL8 and TNF in both strains. Emetine reduced NFkB expression in SCC-9. Inhibitors reduced p-NFkB in both cell lines. The inhibitors caused increased gene expression of HDAC1, 2, 9 and SIRT 1 in CAL-27 and of HDAC9 and SIRT1 in SCC9. CBL0137 increased HDAC1 and HDAC11 in SCC9. The treatments reduce the levels of acetylation of histones H3K9, H3K36, H3K79, H4K5 and H4K12 in CAL-27 and of H3K79, H3K79, H4K5 and H4K12 in SCC9; further, CBL0137 reduced H3K36 in SCC9. The combined treatment of Emetine + Cisplatin and CBL0137 + Cisplatin and monotherapy with Emetine reduced the number of CSC in CAL-27, while CBL0137 alone or combined treatment with Cisplatin were more efficient in SCC9. The isolated Emetine treatment was more efficient in reducing CSC in both strains. Both drugs inhibited the colony formation potential and Emetine + Cisplatin and Emetine reduced the number of invasive cells in CAL-27 and SCC-9, respectively. Emetine + Cisplatin was the most efficient treatment in inhibiting the migration potential. With the results obtained, it is suggested that NFkB is related to the accumulation of CSC in CisR cell lines and that its inhibition increases the sensivity to treatment with Cisplatin by reducing the population of CSC and tumor aggressiveness markers.