Antracose é um termo usado para descrever a pigmentação preta dos pulmões e árvore traqueobrônquica causada pelo depósito de partículas de carbono inaladas. Evidências recentes indicam que o particulado da poluição atmosférica tem um papel importante no estabelecimento da antracose e possivelmente no desenvolvimento de câncer no sistema respiratório, devido às substâncias carcinogênicas provenientes da poluição que permanecem depositadas no pulmão. O objetivo deste trabalho foi verificar a reatividade do particulado da antracose (MPA), avaliando a expressão de oncogenes em células de brônquios humanos normais (BEAS-2B) ou adenocarcinoma de pulmão (A549) em co-cultura com macrófagos M1 ou M2 expostas ao MPA. O material particulado ambiental (DEP) foi coletado da exaustão de um motor a diesel e o MPA foi coletado de pacientes que vieram a óbito e foram submetidos a autópsia do Serviço de Verificação de Óbitos da Capital da USP (SVO). Ambos foram quimicamente caracterizados para Hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos (HPA) por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa. Após a exposição a diferentes concentrações de cada particulado, foram realizados testes de viabilidade MTT e LDH em monoculturas de BEAS-2B e A549. Após 24 horas de exposição a MPA ou DEP a 50 g/mL em co-culturas e monoculturas, foram avaliadas por RT-PCR as expressões dos genes envolvidos nas vias de resposta a xenobióticos CYP1A1 e CYP1B1 e marcadores de câncer: TP53, AGR2 (mecanismo de reparo do DNA e ciclo celular) PTEN, PIK3CA e EGFR (crescimento celular). Foi realizada imunofenotipagem por citometria de fluxo dos macrófagos expostos ao MPA e dosadas citocinas IL-1, TNF-, IL-6, IL-8, IL-10 e INF- no sobrenadante das mono e co-culturas. Os resultados mostraram que para MPA, os HPAs mais frequentes apresentavam-se com 2 anéis e 4 ou 5 anéis para DEP, e maior quantidade de HPA em g/g em DEP em comparação com MPA. MTT e LDH apontaram baixa citocoxicidade de MPA e DEP após 24 horas de exposição. A imunofenotipagem mostrou heterogeneidade entre os macrófagos, exibindo marcadores M1 e M2 tanto em mono, quanto em co-culturas, enquanto as citocinas IL-1, TNF-, IL-6, IL-8 aumentaram após a exposição a MPA, mas não em DEP. Os oncogenes permaneceram inalterados nas mono e co-culturas, enquanto os genes CYP1A1 e CYP1B1 aumentaram a expressão após exposição ao DEP, mas não ao MPA. Os achados deste trabalho indicam que o MPA não é um particulado inerte, mas provocou uma resposta diferente nas células pulmonares e nas co-culturas em comparação ao DEP, provavelmente relacionado às diferenças em suas composições

Anthracosis is a term used to describe the black pigmentation of the lungs and tracheobronchial tree caused by the deposition of inhaled carbon particles. Recent evidence indicates that particulate matter from air pollution plays an important role in the establishment of anthracosis and possibly in the development of cancer in the respiratory system, due to carcinogenic substances from pollution that remain deposited in the lung. The aim of this work was to verify the reactivity of anthracosis particulate matter (MPA), evaluating the expression of oncogenes in normal human bronchial cells (BEAS-2B) or lung adenocarcinoma (A549) in co-culture with M1 or M2 macrophages exposed to MPA. Environmental particulate matter (DEP) was collected from diesel exhaust engine and MPA was collected from at the USP Capital Death Verification Service (SVO). Both were chemically characterized for Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAH) by gas chromatography coupled to mass spectrometry. After exposure to different concentrations of each particulate, MTT and LDH viability tests were performed on monocultures of BEAS-2B and A549. After 24 hours of exposure to MPA or DEP at 50 g/mL in co-cultures and monocultures, the expressions of genes involved in the xenobiotic response CYP1A1 and CYP1B1 and cancer markers TP53, AGR2 (DNA repair mechanism and cell cycle), PTEN, PIK3CA and EGFR (cell growth) were evaluated by RT-PCR. Immunophenotyping of macrophages exposed to MPA was performed by Flow Cytometry and the cytokines IL-1, TNF-, IL-6, IL-8, IL-10 and INF- were measured in the supernatant of mono and co-cultures. The results showed PAHs with 2 rings for MPA and 4 or 5 rings for DEP, also a higher amount of PAH in g/g in DEP compared to MPA. MTT and LDH showed low cytotoxicity of MPA and DEP after 24 hours of exposure. Immunophenotyping showed heterogeneity in macrophages, displaying M1 and M2 markers both in mono and co-cultures, while the cytokines IL-1, TNF-, IL-6, IL-8 increased after exposure to MPA, but not DEP. Oncogenes remained unchanged in mono- and co-cultures, while CYP1A1 and CYP1B1 genes increased expression after exposure to DEP, but not MPA. The findings of this work indicate that MPA is not an inert particulate, but induced a different response in pulmonary cells and co-cultures compared to DEP, probably related to differences in their compositions