• JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
  • JoomlaWorks Simple Image Rotator
 
  Bookmark and Share
 
 
Tese de Doutorado
DOI
https://doi.org/10.11606/T.5.2021.tde-13122021-111346
Documento
Autor
Nome completo
Rodrigo Guimarães de Souza
E-mail
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
São Paulo, 2021
Orientador
Banca examinadora
Alves, Milton Ruiz (Presidente)
Paula, Mônica de Cássia Alves de
Santo, Ruth Miyuki
Torricelli, André Augusto Miranda
Título em português
Papel do estresse oxidativo no envelhecimento das glândulas lacrimais
Palavras-chave em português
Aparelho lacrimal
Catepsina S
Envelhecimento
Estresse oxidativo
Inflamação
Interferon gama
Síndromes do olho seco
Resumo em português
INTRODUÇÃO: O envelhecimento desempenha um fator relevante no processo de alterações oftalmológicas, sendo um agente contribuinte para o surgimento de inúmeras patologias. O estresse oxidativo e a diminuição da capacidade de reparo e degradação celular contribuem para acentuar as alterações do envelhecimento. Por meio do fator nuclear eritroide 2 (NRF2) o organismo expressa proteínas antioxidantes que atuam como fatores protetores. A glândula lacrimal representa uma estrutura fundamental na compreensão das alterações imunológicas e estruturais que ocorrem no decorrer da vida e seu estudo contribui de forma significativa para um melhor conhecimento sobre o olho e suas estruturas na senilidade. Com este estudo poderemos entender melhor os mecanismos envolvidos no estresse oxidativo da glândula lacrimal e compreender suas alterações, além de discutirmos o potencial uso de uma dieta antioxidante como adjuvante neste processo. JUSTIFICATIVA: Os resultados deste estudo contribuem para um melhor conhecimento sobre a intersecção entre estresse oxidativo e envelhecimento da glândula lacrimal. Auxiliam para as respostas de vários questionamentos envolvidos neste processo, além de propor eventuais opções de tratamento por meio da modulação da via do estresse oxidativo. MÉTODOS: Camundongos knock-out para o fator nuclear eritroide 2 (Nrf2)-/- e do tipo selvagem (WT) foram usados com 2-3 meses (2-3M) e 12-13 meses (12-13M). Um grupo separado de camundongos C57BL/6 (B6) com 15,5-17 meses de idade recebeu uma dieta contendo um indutor Nrf2 (Oltipraz) por 8 semanas. As GL foram excisadas e coletadas para análise histológica, imunocoloração, expressão gênica, western blot e citometria de fluxo. Lâminas histológicas foram usadas para medir o focus score da GL. RESULTADOS: GL de camundongos B6 idosos apresentaram infiltração linfocítica significativamente maior, níveis mais altos de transcrição de mRNA de MHC II, IFN-, IL-1, TNF- e catepsina, além de maior expressão proteica de nitrotirosina (NT) e 4- hidroxinonenal (4-HNE). Os camundongos jovens Nrf2-/- mostraram um aumento nos níveis de transcrição de mRNA de IL-1, IFN-, MHC II e Ctss em comparação aos camundongos WT jovens, e maiores alterações relacionadas à idade foram observadas aos 12-13M de idade. A dieta com Oltipraz diminuiu significativamente a expressão de nitrotirosina e 4-HNE, diminuiu os níveis de mRNA de IL-1 e TNF-, além de reduzir a frequência de células CD45+CD4+ na GL, aumentando significativamente a densidade de células caliciformes em comparação com a dieta padrão. CONCLUSÃO: O aumento dos marcadores de estresse oxidativo e inflamatórios foi constatado com o envelhecimento da glândula lacrimal. A administração da dieta antioxidante Oltipraz® (OTZ) mostrou melhora desses marcadores e do olho seco relacionado à idade
Título em inglês
Role of oxidative stress in aging of the lacrimal glands
Palavras-chave em inglês
Aging
Cathepsin s
Dry eye syndromes
Inflammation
Interferon-gamma
Lacrimal apparatus
Oxidative stress
Resumo em inglês
INTRODUCTION: Aging contributes as a relevant factor to ophthalmologic changes over time, being an important agent associated with many ocular pathologies. Oxidative stress and the decreased mechanisms of cell repair and degradation contribute to accentuate the aging modifications. Through erythroid nuclear factor 2 (NRF2) the body expresses anti-oxidant proteins that act as protective factors. The lacrimal gland is an important structure for the understanding of immunological and structural changes that happen throughout life and its study contributes significantly to a better comprehension about the behavior of the eye in senility. Through this study we can better interpret the mechanisms involved in the oxidative stress in the aging of lacrimal gland, besides discuss the potential use of an antioxidant diet as an adjuvant component in this process. PURPOSE: The outcomes of this study contribute to a better understanding of the intersection between oxidative stress and aging of lacrimal gland. They contribute to answer many questions associated with this process, besides proposing possible treatment options through modulation of the oxidative stress pathway. METHODS: Nuclear factor erythroid derived-2-related factor 2 (Nrf2)-/- and their corresponding wildtype (WT) mice were used at 2-3M and 12-13M. A separate group of 15.5-17M C57BL/6 (B6) mice received a diet containing an Nrf2 inducer (Oltipraz) for 8 weeks. LGs were excised and collected for histology, immunostaining, gene expression, western blot, and flow cytometry analysis. Histology slides were used to measure the LG focus score. RESULTS: Aged B6 LGs showed significantly greater lymphocitic infiltration, higher levels of MHC II, IFN-, IL- 1, TNF-, and Cathepsin S (Ctss) mRNA transcripts, and greater nitrotyrosine (NT) and 4-hydroxyneal (4-HNE) protein. Young Nrf2-/- mice showed an increase in IL-1, IFN- and MHC II and Ctss mRNA transcripts compared to young WT mice, and greater age-related changes at 12-13M of age. Oltipraz diet significantly decreased nitrotyrosine and 4-HNE, decreased the expression of IL-1 and TNF- mRNA transcripts, while decreasing the frequency of CD45+CD4+ cells in LGs and significantly increasing conjunctival goblet cell density compared to a standard diet. CONCLUSION: Increased inflammatory and oxidative stress marks have been found with aging of the lacrimal gland. The administration of an antioxidant diet Oltipraz® (OTZ) is associated with an improvement of age-related dry eye
 
AVISO - A consulta a este documento fica condicionada na aceitação das seguintes condições de uso:
Este trabalho é somente para uso privado de atividades de pesquisa e ensino. Não é autorizada sua reprodução para quaisquer fins lucrativos. Esta reserva de direitos abrange a todos os dados do documento bem como seu conteúdo. Na utilização ou citação de partes do documento é obrigatório mencionar nome da pessoa autora do trabalho.
Data de Publicação
2021-12-14
 
AVISO: Saiba o que são os trabalhos decorrentes clicando aqui.
Todos os direitos da tese/dissertação são de seus autores
CeTI-SC/STI
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP. Copyright © 2001-2023. Todos os direitos reservados.