INTRODUÇÃO: O zika vírus (ZIKV) é um vírus de RNA pertencente ao gênero Flavivírus e foi inicialmente isolado na Floresta Zika, Uganda em 1947. A ocorrência de algumas epidemias ao redor do mundo demonstrou que a presença de doadores de sangue virêmicos assintomáticos proporciona um aumento do risco de transmissão transfusional(TT).Embora o curso clínico das infecções adquiridas por transfusão nos receptores de sangue ainda seja desconhecido, a triagem de doadores através dos testes de ácidos nucléicos (NAT) é uma alternativa importante na manutenção da segurança transfusional. Neste estudo desenvolvemos, validamos e implementamos um teste de NAT in house para detecção do RNA do zika vírus em amostras de doadores de sangue do Departamento de Hemoterapia e Terapia Celular do Hospital Israelita Albert Einstein. MÉTODOS: Tubos primários de plasma provenientes de candidatos à doação de sangue foram submetidos à extração do RNA em uma plataforma automatizada. São utilizados inicializadores e sondas para o ZIKV e para o póliovírus(PV) que funciona como o controle interno da reação, em uma reação duplex.O controle positivo utilizado é um sobrenadante de cultura de ZIKV da linhagem asiática e os controles negativos são amostras de plasma de doadores previamente testados para ZIKV. A reação de cadeia de polimerase em tempo real foi realizada em um termociclador utilizando o protocolo estabelecido pelo fornecedor. RESULTADOS: Entre maio de 2016 e maio de 2018, 3.369 amostras foram coletadas de 3.221 doadores de sangue (intervalo de confiança, 95%; supondo a prevalência do ZIKV RNA de 5%); 31 (0,92%) foram consideradas falso positivas, pois não foram confirmadas reatividades na repetição em duplicata, 14 amostras (0,42%) apresentaram resultado inválido devido às falhas nos controles internos, 4 (0,12%) tiveram volume insuficiente de amostra e em duas (0,05%) houve falha no pipetador automático. Nenhuma amostra foi positiva para o RNA do zika vírus. CONCLUSÕES: Foi possível validar e determinar as características analíticas da metodologia aplicada que se mostrou factível em sua utilização na rotina de triagem laboratorial de doadores de sangue. Este método representa uma alternativa para garantir a segurança transfusional durante epidemias do zika vírus. Não foi identificada nenhuma amostra positiva para o ZIKV RNA, em concordância com o pequeno número de casos autóctones na cidade de São Paulo durante o período do estudo

INTRODUCTION: Zika Virus (ZIKV) is a single stranded RNA genome virus, positive-sense, non-segmented, belonging to the family Flaviviridae, genus Flavivirus and it was initially isolated in the Zika Forest, Uganda in 1947. During the occurrence of some outbreaks around the world, the presence of asymptomatic viremic blood donors have been demonstrated, posing a risk for its transfusion transmission (TT). While the clinical outcome of TT zika is unknow and unpredictable, nucleic acid test (NAT) screening has been proposed to ensure the blood safety. This study developed, validated and implemented an "inhouse" method to detect zika RNA in blood samples donations from the Hemotherapy and Cell Therapy Department at Hospital Israelita Albert Einstein. METHODS: Primary plasma tubes from donors were submitted to nucleic acid extraction on an automated platform. An amplification mixture containing primers and probes for zika and Polio vaccine virus (PV), as an internal control, in duplex, are added. The positive control of the reaction of a ZIKV culture supernatant from the Asian lineage and negative controls were plasma samples from donors previously tested for ZIKV. Real-Time polymerase chain reaction is then performed in a thermocycler using the protocol established by the amplification mixture supplier. RESULTS: From May 2016 to May 2018, 3,369 samples were collected from 3,221 blood donors (confidence coefficient, 95%; supposed ZIKV RNA prevalence, 5%),31 (0.92%) were considered false positive since they did not confirm initial reactivity when repeated in duplicates,14 (0.42%) had their results invalid due to repeat failure in the internal control,4 (0.12%) volume insufficient sample and 2 (0.05%) automatic pipettor failures. No zika RNA reactive sample was identified. CONCLUSION: It was possible to determine the analytical characteristics of the developed method and the test showed feasible to be incorporated into the blood screening routine. This method represents an alternative to warrant the safety of the blood supply during zika virus epidemics. No zika RNA+ donation was detected in our screening blood donors routine what can be correlated to the very low number of autochtonous zika cases in São Paulo city during the study period. However, a generic NAT system covering a group of flaviviruses which are circulating in the region such as ZIKV, DENV and YFV among others, could be an useful tool