A leptospirose é uma zoonose bacteriana causada por leptospiras, com surtos sazonais, principalmente em países tropicais e subtropicais. Apresenta sintomas inespecíficos dificultando o diagnóstico clínico e, portanto, o diagnóstico laboratorial da leptospirose é importante para a confirmação dos casos suspeitos e para o monitoramento da doença. As leptospiras apresentam uma vasta variedade antigênica com inúmeras proteínas em sua membrana externa. O conhecimento da resposta imunológica de pacientes com leptospirose contra essas proteínas será importante para auxiliar no desenvolvimento de metodologias para o diagnóstico e para utilização em vacinas humanas. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi avaliar o perfil antigênico de 20 sorovares de leptospiras através da técnica de SDS-PAGE e avaliar a reatividade sorológica de amostras de soro de pacientes portadores de leptospirose através da metodologia de Immunoblotting frente a cepas patogênicas e saprófitas de leptospiras. Foram utilizados 20 sorovares de leptospiras e 19 soros reagentes de pacientes com leptospirose confirmados pelo teste de aglutinação microscópica (MAT) para cada um dos sorovares exceto sorovar Pomona. Foram utilizados também quatro soros provenientes de casos de óbitos com títulos de 100 no MAT contra os sorovares Panama e Castellonis. Como controle negativo, foi utilizado 1 soro com resultado reagente para dengue e negativo para leptospirose. Através da técnica de SDS-PAGE, foi demonstrado que as frações antigênicas dos sorovares se concentraram, em sua maioria, em massa molecular entre 37-50 kDa. Também foi possível a visualização de frações entre 50-75 kDa. O "Immunoblotting foi realizado com anticorpos anti-IgM humanos e os óbitos também com anti-IgG. O resultado da reatividade entre soros e antígenos possibilitou uma visualização de frações proteicas que variaram, em média, entre 10-15 kDa. Um caso de óbito apresentou reatividade com o sorovar Panama ao utilizar anti-IgG. Para cada antígeno de sorovar foi utilizado um soro reagente específico para esse antígeno e foi possível verificar reatividade em todos. Na membrana do antígeno de sorovar Djasiman, o soro reagente para sorovar Cynopteri apresentou reatividade com frações proteicas de massa molecular entre 50-75 kDa. Na membrana do antígeno de sorovar Patoc, o soro reagente para sorovar Tarassovi apresentou reatividade com frações proteicas de massa molecular acima de 100 kDa. Nas membranas com antígeno dos sorovares Icterohaemorrhagiae e Copenhageni, o soro reagente para sorovar Tarassovi também apresentou reatividade com massa molecular entre 35-50 kDa. Os soros reagentes para os sorovares Sejroe, Hardjo e Wolffi, foram os que apresentaram maior reatividade entre todas as membranas dos antígenos, sendo possível visualizar mais de uma fração por massa molecular. Os resultados obtidos poderão contribuir para o desenvolvimento de testes para o diagnóstico sorológico da leptospirose humana e na produção de vacinas humanas, com um estudo mais aprofundado das proteínas

Leptospirosis is a bacterial zoonosis caused by leptospires, with seasonal outbreaks, mainly in tropical and subtropical countries. It presents nonspecific symptoms, making clinical diagnosis difficult and, therefore, the laboratory diagnosis of leptospirosis is important for the confirmation of suspected cases and for the monitoring of the disease. Leptospires present a wide antigenic variety with numerous proteins in their outer membrane. Knowledge of the immune response of patients with leptospirosis against these proteins will be important to the development of methodologies for diagnosis and for using in human vaccines. Thus, the objective of this work was to evaluate the antigenic profile of 20 serovars of leptospires through the SDS-PAGE technique and to evaluate the serological reactivity of serum samples from patients with leptospirosis through the immunoblotting methodology against pathogenic and saprophytes strains. Twenty serovars from leptospires and 19 sera from patients with laboratory-confirmed leptospirosis by the microscopic agglutination test (MAT) were used for each of the serovars except serovar Pomona. Four sera samples from death cases with MAT titers of 100 against the Panama and Castellonis serovars were also used. As a negative control, one serum with reactive result for dengue and negative result for leptospirosis was used. Through the SDS-PAGE technique, it was demonstrated that the antigenic fractions of the serovars were mostly concentrated in molecular weight between 37-50 kDa. It was also possible to visualize fractions between 50-75 kDa. The immunoblotting was performed with anti-human IgM antibodies and the deaths cases also with anti-IgG. The result of the reactivity between sera and antigens showed protein fractions that varied from 10 to 15 kDa. One death case showed reactivity with serovar Panama using anti-IgG. For each antigen, a specific reactive serum for that antigen was used and it was possible to verify the reactivity present in all of them. Protein fractions with molecular weight above 50 kDa were visualized on the membrane of the serovar Djasiman antigen showed reactivity with the reagent serum for serovar Cynopteri, with fractions between 50-75 kDa. The membrane with antigen of serovar Patoc with the reactive serum for serovar Tarassovi showed reactivity with molecular weight above 100 kDa. The reactive serum for serovar Tarassovi also showed reactivity with molecular weight between 35-50 kDa on the membrane with antigen of serovars Icterohaemorrhagiae and Copenhageni antigen. Reactive sera for serovars Sejroe, Hardjo and Wolffi showed the highest reactivity among all membranes of the antigens, with a visualization of more than one fraction by molecular weight. The results obtained should contribute to the development of tests for the serological diagnosis of human leptospirosis and to the production of vaccines for humans, in-depth study of proteins