A doença de Chagas é uma antropozoonose tropical causada pela infecção do parasita Trypanosoma cruzi (T. cruzi) em humanos. A doença se inicia na fase aguda, por vezes assintomática, na qual ocorre extensa proliferação parasitária e intensa atividade do sistema imune inato, seguida da fase crônica, com parasitemia reduzida e desenvolvimento de imunidade adaptativa. Grande parte dos indivíduos na fase crônica acaba por permanecer na forma indeterminada da doença, porém 20 a 40% dos indivíduos desenvolvem complicações cardíacas ou gastrointestinais em algum momento da vida. A cardiomiopatia chagásica é decorrente de um cenário complexo de interação entre o T. cruzi e o organismo do hospedeiro, com importante participação das células cardíacas, as quais, uma vez infectadas, apresentam alterações transcricionais e metabólicas importantes para a viabilidade da replicação parasitária. Neste trabalho, utilizamos cardiomócitos derivados de hiPSCs (hiPSC-CM) na investigação dos padrões de infecção, proliferação e resposta transcricional ao T. cruzi nesse tipo celular em pacientes indeterminados e cardiopatas. Nossos dados mostram que a eficiência de infecção e proliferação do T. cruzi não diferem significativamente em PBMCs e hiPSC-CM de ambos os grupos, até 48 horas após infecção. Análises de RNA-seq em hiPSC-CM infectados por 24 horas, entretanto, mostraram um perfil diferente de resposta transcricional ao parasita. Cardiomiócitos de indivíduos indeterminados apresentaram uma resposta mais bem orquestrada quanto à expressão de genes induzíveis por interferon, regulando positivamente genes relacionados ao processamento e apresentação de antígenos por MHC de classe I e II bem como moléculas co-estimulatórias do sistema imune. Ainda, regularam negativamente genes de produção de colágeno e de componentes da matriz extracelular, indicando uma estratégia protetiva a um comportamento pró- fibrótico. Cardiomiócitos de indivíduos cardiopatas, por sua vez, apresentaram aumento de expressão das vias de mTORC1 e resposta a formação de proteínas mal dobradas, ambas indicativas de aumento de produção de ROS intracelular. Esses dados apontam para um padrão diferencial de resposta, o qual pode ter impacto no desenvolvimento de um desfecho crônico com ou sem apresentação de sintomas cardíacos

Chagas disease is a tropical zoonosis caused by the infection of Trypanosoma cruzi in humans, through the bite of insects from the Triatominae subfamily, also known as kissing bugs. After infection, the host present an acute phase (usually asymptomatic) in which an extensive parasite proliferation and intense innate immune activity occurs, followed by a chronic phase, characterized by low parasitemia and development of specific immunity. Most individuals in the chronic phase remain in the indeterminate form without symptoms or organ damage. However, 20 to 40% of individuals develop cardiac or gastrointestinal complications at any time in life. Chronic Chagas cardiomyopathy occurs due to a complex interaction between T. cruzi and the host, with an important role of cardiac cells which, once infected, present transcriptional and metabolic alterations that are crucial for the parasite survival and replication. In this work, we used hiPSCs-derived cardiomyocytes (hiPSC-CM) to investigate patterns of infection, proliferation and transcriptional response in indeterminate and cardiac patients. Our data show that T. cruzi infection and proliferation efficiency did not differ significantly in PBMCs and hiPSC-CM from both groups, up to 48 hours after infection. However, RNA-seq analysis in hiPSC-CM infected for 24 hours showed a different transcriptional response to the parasite. Cardiomyocytes from indeterminate individuals present a better orchestrated expression of interferon-inducible genes, showing significant expression of genes related to antigen processing and presentation as well as immune co-stimulatory molecules. Furthermore, the downregulation of collagen production genes and extracellular matrix components in these cells suggests a protective strategy when facing a pro-fibrotic scenario. Cardiomyocytes from cardiac individuals, in turn, showed increased expression of mTORC1 pathway and unfolded protein response genes, both associated to increased intracellular ROS production. These data point to a differential pattern of response, determined by baseline genetic differences between groups, which may have an impact on the development of a chronic outcome with or without the presentation of cardiac symptoms