O potencial terapêutico de moléculas doadoras de H₂S, incluindo de liberação espontânea ou lenta, híbridas ou com liberação de H₂S direcionado para mitocôndria vem sendo demonstrado para várias doenças, incluindo de cunho inflamatório. Nesse contexto, os efeitos e mecanismos do H₂S subjacentes à resolução e cicatrização de feridas resultantes de lesão térmica, uma das principais causas de morte por traumas, ocupando a 4ª maior causa de trauma são limitados e controversos. Apesar da diversidade dessas moléculas, muitas ainda estão longe de ser satisfatórias, seja por eficácia reduzida ou insolubilidade destas em água. Apesar de nanomateriais apresentarem citotoxicidade e incompatibilidades com fármacos ou princípios ativos (PA), os sistemas de entrega nanoestruturados visam aprimorar e fornecer concentrações efetivas destes no sítio de ação. Este estudo busca desenvolver e avaliar um sistema nanoestruturado de entrega tópica para o doador mitocondrial de H₂S, AP39, em modelo de lesão térmica na pele dorsal de camundongos magros e obesos e, também, em modelo de cicatrização in vitro (cultura de fibroblastos 2D; linhagem 3T3). Propõe-se também avaliar o papel biológico do H₂S no microambiente da lesão cutânea. A lesão cutânea (queimadura de 2º grau) foi induzida pela aplicação tópica rápida (30 s) de uma placa esferoide (disco 5 mm) quente (80°C) na pele dorsal depilada de camundongos fêmeas C57BL/6 (12 semanas) selvagens sob anestesia inalatória (isoflurano 5% em O₂). Os camundongos foram alimentados com dieta padrão (DP) após o desmame e, na 12ª semana de vida, foram submetidos à eutanásia e parâmetros inflamatórios e moleculares foram avaliados na pele e fluidos destes. A molécula AP39 foi incorporada com sucesso em quatro dos sistemas de entrega (nanopartícula, nanoemulsão e beads) desenvolvidos. O teste de citotoxicidade do AP39 em linhagem celular 3T3 mostrou que as células estavam viáveis em concentrações inferiores a 2 mM, enquanto a concentração de 0,2 mM foi capaz de induzir a migração destas células. De posse do sistema nanoestruturado ideal contendo AP39 (gel de fase lamelar composto por fosfatidilcolina 98% (30%), monoleina (10%) e óleo de girassol (60%) foi possível observar que a aplicação tópica desta formulação na lesão cutânea induzida por placa quente (80°C. 30 s), 24 h após, não exerceu efeito citoprotetor e tampouco anti-inflamatório, uma vez que a atividade da MPO e o perfil histopatológico na pele lesada não diferiu do grupo com lesão térmica não tratado; todavia, esse mesmo tratamento por um período de 8 dias reduziu a concentração de proteínas carboniladas, e estimulou a atividade das enzimas antioxidantes (catalase, glutationa peroxidase e glutationa s-transferase) paralelo ao aumento na expressão do Nrf2, mas não inibiu o infiltrado celular, medido pela atividade da MPO. Conclui-se que foi possível desenvolver um sistema de entrega compatível com o AP39; em modelo de cultura, a molécula promove a migração de fibroblastos; e o tratamento prolongado com o AP39 é capaz de aumentar a atividade antioxidante do tecido, promovendo melhoras no tratamento e redução da lesão.

The therapeutic potential of H₂S donor molecules, including spontaneous or slow release, hybrids or H₂S directed to mitochondria, has been demonstrated for several diseases, including inflammatory condititions. In this context, In this context, the effects and mechanisms of H₂S underlying the resolution and wound healing resulted from thermal injury, one of the main causes of death from trauma, occupying the 4th largest cause of trauma, are limited and controversial. Despite the diversity of these molecules, many are still far from been satisfactory, either due to their reduced efficacy or insolubility in water. Although nanomaterials present cytotoxicity and incompatibilities with drugs or active ingredients, nanostructured delivery systems aim to improve and provide effective concentrations of these at the site of action. This study seeks to develop and evaluate a topic nanostructured delivery system for the mitochondrial H₂S donor, AP39, in a model of thermal injury on the dorsal skin of thin and obese mice and, also, in an in vitro healing model (2D fibroblast culture; lineage 3T3). It is also proposed to evaluate the biological role of H₂S in the microenvironment of the skin lesion. The cutaneous lesion (2nd degree burn) was induced by topical application (30 s) of a hot (80 ° C) spheroid plate (disc 5 mm) on the depilated dorsal skin of female C57BL/6 mice (12 weeks) under inhalatory anesthesia (5% isoflurane in O₂). The mice were fed with a standard diet (PD) after weaning and, at the 12th week of life, they were euthanized, inflammatory and molecular parameters were evaluated on their skin and fluids. The AP39 molecule was successfully incorporated into three delivery systems (nanoparticle, nanoemulsion and beads) developed. The cytotoxicity test of AP39 in 3T3 cells showed that the cells were viable at concentrations below 2 mM, while the concentration of 0.2 mM was able to induce migration of these cells. With the ideal nanostructured system containing AP39, a lamellar phase gel nanoemulsion composed of 98% phosphatidylcholine (30%), monolein (10%) and sunflower oil (60%) it was observed that the topical application of this formulation in the skin lesion, induced by hot plate (80 °C 30 s), 24 h after, did not have a cytoprotective or anti-inflammatory effect, since the MPO activity and the histopathological profile on the injured skin did not differ from the group with untreated thermal injury; The same treatment for a period of 8 days reduced the concentration of carbonylated proteins, and stimulated the activity of antioxidant enzymes (catalase, glutathione peroxidase and glutathione s-transferase), a increase in Nrf2 expression, but did not inhibit cell infiltrate. In conclusion, It was possible to develop a delivery system compatible with the AP39; in a cell model, the molecule promotes the migration of fibroblasts; and the prolonged treatment with the AP39 is capable to increase the antioxidant activity of the tissue, promoting improvements in the treatment and reduction of the lesion.