Trypanosoma cruzi e Trypanosoma brucei são protozoários parasitos responsáveis pela doença de Chagas e pela doença do sono, as quais resultam em um elevado número de mortes anualmente. Esses parasitos possuem um ciclo de vida complexo que alterna entre formas de vida replicativas e não replicativas. Apesar da caracterização de um grande número de vias moleculares nestes organismos, ainda existem muitas lacunas na compreensão dos processos que coordenam o metabolismo do DNA. A proteína Replication Protein A (RPA), principal ligante de fita simples de DNA de eucariotos, é um complexo heterotrimérico formado por três subunidades RPA-1, RPA2 e RPA-3 que participa em vários processos fundamentais como replicação, reparo e sinalização de checkpoint. A RPA de tripanossomatídeos apresenta peculiaridades estruturais significativas em comparação a outros eucariotos, como a falta de domínio de DBD-F (70N) que interage com proteínas majoritariamente envolvidas na resposta a danos no DNA (DDR) e substituições em resíduos de aminoácidos em regiões conservadas, levantando questões sobre a conservação de funções canônicas descritas em mamíferos e leveduras. Neste trabalho, mostramos que o RPA de tripanossomatídeos pode interagir com DNA fita simples e é de fato importante para replicação e resposta a danos de DNA. Além disso, conseguimos encontrar diversas novas características nas RPA de tripanossomatídeos, como a descoberta de (i) modificações pós-traducionais não descritas (ii) uma nova proteína RPA-like que parece ser exclusiva de tripanossomatídeos interagindo com o complexo RPA (iii) um processo de exportação nuclear ciclo de vida dependente e (iv) alta afinidade pelo DNA de fita simples telomérico rico em G.