O DM1 é uma doença autoimune caracterizada pela disfunção e morte de células β pancreáticas produtoras de insulina. Essa destruição se dá através da ativação de vias pró-apoptóticas, como a do fator de transcrição NF-B e do estresse RE, por citocinas pró-inflamatórias. O MODY1 é um subtipo de DM caracterizado por uma mutação no gene HNF-4α, que acarreta deficiência na secreção de insulina. Este fator de transcrição está envolvido na manutenção da homeostase do RE e em hepatócitos é ativado por citocinas e modula a resposta inflamatória. Além disso, sabe-se que em outros tipos celulares há um crosstalk entre HNF-4α e ERK1/2, que em células β é um importante modulador da ativação pró-apoptótica de NF-B por citocinas pró-inflamatórias. Assim, para um melhor entendimento da relação de HNF-4α no contexto pró-inflamatório observado durante o desenvolvimento do DM1, este trabalho teve como objetivo avaliar se a ativação de HNF-4α é modulada por citocinas pró-inflamatórias e se esse efeito pode estar relacionado com a ativação pró-apoptótica de ERK1/2 e NF-B em células β. Para isso avaliamos em células INS-1E (insulinoma de rato) a ativação de HNF-4α através de promotor repórter, bem como a ativação de ERK1/2 e NF-B por western blotting, após exposição a citocinas pró-inflamatórias na presença e na ausência de HNF-4α, que foi silenciado pelo uso de siRNA específico. Nossos resultados mostram que a ativação de HNF-4α sofre modulação temporal por citocinas pró-inflamatórias em células β e que o silenciamento desse fator de transcrição parece prevenir a morte dessas células induzido por citocinas. Esse efeito do HNF-4α nas células β pode estar relacionado com ERK1/2 e NF-B, uma vez que a ativação desses fatores é modulada por HNF-4α. Essas informações são de grande interesse para um melhor entendimento das vias relacionadas a morte e disfunção de células β no desenvolvimento do DM1.

Type 1 Diabetes mellitus (T1D) is an autoimmune disease characterized by dysfunction and death of insulin-producing pancreatic β cells. This destruction occurs through pro-apoptotic pathways, such as the activation of NF-B transcription factor and ER stress by pro-inflammatory cytokines. MODY1 is a subtype of DM characterized by a mutation in the HNF-4α gene, which causes a deficiency in insulin secretion. This transcription factor is involved in the maintenance of ER homeostasis and in hepatocytes is activated by cytokines and modulates inflammatory responses. Furthermore, it is known that in other cell types there is a crosstalk between HNF-4α and ERK1/2, which in β cells is an important modulator of the pro-apoptotic activation of NF-B by pro-inflammatory cytokines. Thus, for a better understanding of the relationship of HNF-4α in the pro-inflammatory context observed during the development of T1D, this study aimed to evaluate whether the activation of HNF-4α is modulated by pro-inflammatory cytokines and whether this effect may be related to the pro-apoptotic activation of ERK1/2 and NF-B in β cells. For this, we evaluated in INS-1E cells (rat insulinoma) the activation of HNF-4α through a promotor reporter, as well as the activation of ERK1/2 and NF-B by western blotting, after exposure to pro-inflammatory cytokines in the presence and in the absence of HNF-4α, which was silenced by the use of specific siRNA. Our results show that HNF-4α activation is temporally modulated by pro-inflammatory cytokines in β cells and that silencing of this transcription factor seems to prevent cytokine-induced β cell death. This effect of HNF-4α on β cells may be related to ERK1/2 and NF-B, since the activation of these factors is modulated by HNF-4α. This information is of great interest for a better understanding of the pathways related to β cell death and dysfunction in the development of T1D.