A lesão renal aguda (LRA) é uma síndrome de fisiopatologia multifatorial e complexa, que pode ser causada por isquemia, sepse e o uso de medicamentos nefrotóxicos. Um dos agentes nefrotóxicos mais comuns é a cisplatina, fármaco antineoplásico que tem a capacidade de interferir nos mecanismos de reparo do DNA, levando à apoptose nas células cancerígenas. O acúmulo da cisplatina nos túbulos renais pode gerar a LRA e resultar na intensa diminuição da taxa de filtração glomerular, representada pela elevação da creatinina sérica, geração de estresse oxidativo nos rins e o desenvolvimento de um processo inflamatório no tecido renal. Desta forma, a cisplatina tem sido adotada como indutor de LRA em modelos experimentais. Neste sentido, o zebrafish (Danio rerio) tem despontado como ferramenta para estudar diversas doenças humanas visto que esse pequeno peixe tropical possui atributos fisiológicos e anatômicos semelhantes aos de mamíferos e alta similaridade genética com humanos, além de possuir vantagens como tamanho pequeno, alta taxa de reprodução externa e transparência óptica da larva. Atualmente, não existe um tratamento preventivo para a LRA causada pela cisplatina, deste modo, se torna imprescindível avaliar métodos que possam atuar na renoproteção e evitar o desenvolvimento desta condição durante o tratamento dos pacientes com câncer. O uso de probióticos tem surgido como uma possibilidade de tratamento para doenças inflamatórias incluindo a LRA. Assim, nossa hipótese aponta que o probiótico Bacillus subtilis (B. subtilis) será capaz de modular o processo inflamatório da LRA induzida pela cisplatina em larvas de zebrafish. O modelo atual de indução de LRA por cisplatina na larva de zebrafish requer um grande desafio técnico e especialização para sua aplicação, é com base nisso que este projeto teve como objetivo desenvolver um modelo de LRA utilizando à cisplatina como agente inflamatório e conjuntamente estudar o papel do probiótico B. subtilis, na modulação da inflamação. Para isso, induzimos e caracterizamos a inflamação ao adicionar cisplatina na água de larvas de 7 dias pós-fertilização (dpf) e investigamos os efeitos do B. subtilis nestes animais. Nossos dados sugerem que a cisplatina afeta a sobrevida das larvas de forma dose-dependente e induz a expressão aumentada de IL-12, IL-6 e IL-8 após 48 horas. Larvas expostas a 0,10 mg/mL de cisplatina pelo mesmo período de tempo apresentaram diminuição de células mieloides na região glomerular dos pronefros. Por outro lado, foi observado o aumento de neutrófilos em toda larva após 48 horas. A análise in sílico realizada indica uma possível via a ser estudada (Nrf2) no futuro. Por último, resultados preliminares utilizando o tratamento com o probiótico não demonstraram afetar a sobrevivência das larvas expostas à cisplatina.

The acute kidney injury (AKI) is a multifactorial and complex pathophysiology syndrome, which can be caused by ischemia, sepsis and the use of nephrotoxic drugs. One of the most common nephrotoxic agents is cisplatin, an antineoplastic drug that has the ability to interfere with DNA repair mechanisms, leading to apoptosis in cancer cells. The accumulation of cisplatin in the renal tubules can generate AKI resulting in an intense decrease in the glomerular filtration rate, represented by the increase in serum creatinine, generation of oxidative stress in the kidneys and the development of an inflammatory process in the renal tissue. Thus, cisplatin has been adopted as an AKI inducer in experimental models. In this sense, the zebrafish (Danio rerio) has emerged as a tool to study several human diseases since this small tropical fish has physiological and anatomical attributes similar to those of mammals and high genetic similarity with humans, in addition to having advantages such as small size, high rate of external reproduction and optical transparency of the larva. Currently, there is no preventive treatment for AKI caused by cisplatin, therefore, it is essential to evaluate methods that can act in renoprotection and to avoid the development of this condition during the treatment of cancer patients. The use of probiotics has emerged as a possibility of treatment for inflammatory diseases including AKI. Thus, our hypothesis points out that the probiotic Bacillus subtilis (B. subtilis) will be able to modulate the inflammatory process of AKI induced by cisplatin in zebrafish larvae. The current model of AKI induction by cisplatin in zebrafish larvae requires a great technical challenge and specialization for its application, it is based on this that this project aims to develop an AKI model using cisplatin as an inflammatory agent and jointly study the role of the probiotic B. subtilis in the modulation of inflammation. For this, we induced and characterized inflammation by adding cisplatin in the water of larvae 7 days post fertilization (dpf) and investigate the effects of B. subtilis on these animals. Our data suggest that cisplatin affects larval survival in a dose-dependent manner and induces increased expression of IL-12, IL-6 and IL-8 after 48 hours. Larvae exposed to 0.10 mg/mL of cisplatin for the same period of time showed a decrease in myeloid cells in the glomerular region of the pronephros. On the other hand, an increase in neutrophils was observed in all larvae after 48 hours. The in silico analysis performed indicates a possible path to be studied (Nrf2) in the future. Finally, preliminary results using the treatment with the probiotic did not affect the survival of larvae exposed to cisplatin.