Pseudomonas aeruginosa e Candida spp. são patógenos formadores de biofilme comumente encontrados colonizando cateteres venosos centrais e aparelhos de ventilação mecânica, estando associados principalmente a casos de pneumonia e infecção da corrente sanguínea. A co-infecção por esses agentes apresenta maiores taxas de mortalidade quando comparada às causadas por uma única espécie microbiana. Portanto, torna-se crucial analisar as suas interações e estratégias de tratamento. Neste trabalho foi padronizado um protocolo para estudar a formação in vitro de biofilmes mistos de P. aeruginosa com Candida spp. e posteriormente a ação dos antimicrobianos Caspofungina, Micafungina, Anfotericina B e Polimixina B foi avaliada tanto para células planctônicas de cada micro-organismo quanto em biofilmes mono- e polimicrobianos. A biomassa dos biofilmes foi quantificada pela coloração com cristal violeta (CV) a 590 nm. Além disso, os biofilmes foram raspados e as células aderentes foram ressuspendidas em PBS, diluídas e plaqueadas para a eterminação da unidade formadora de colônia (UFC). No presente estudo,a anfotericina B apresenta excelente ação sobre células planctônicas e pouca ação antibiofilme polimicrobiano; entretanto, o antibiótico Polimixina B foi eficaz em reduzir de forma significativa a biomassa e a viabilidade dos biofilmes e apresentou ação sobre a viabilidade de Candida spp. em biofilme, em concentrações maiores ou iguais a 8 g/mL. Caspofungina e Micafungina mostraram ter efeito para células planctônicas e células de biofilme de Candida spp. e de P. aeruginosa. Em biofilmes mistos a Caspofungina reduziu de maneira dose-dependente o número de UFC de Candida spp. em até 5 Log e em até 2 Log o número de UFC de P. aeruginosa, permitindo afirmar que esse antifúngico possui efeito na redução de biofilmes polimicrobianos de Candida spp. e P. aeruginosa. Resultados semelhantes foram encontrados no tratamento com Micafungina. As equinocandinas demonstraram potencial efeito em desorganizar a estrutura do biofilme, reduzindo a sua biomassa total e a viabilidade celular fúngica e bacteriana no interior dos biofilmes, comprovando seu efeito antibiofilme. Esses achados permitem sugerir que as equinocandinas podem ser utilizadas como uma alternativa no tratamento de infecções polimicrobianas envolvendo bactérias e fungos. No entanto, para fins de aplicação na terapêutica clínica, serão necessários testes adicionais in vitro e in vivo para avançar os resultados aqui encontrados e definir as concentrações antimicrobianas, bem como a duração do tratamento e formas de administração necessárias para o tratamento das infecções causadas por biofilmes polimicrobianos.

Pseudomonas aeruginosa and Candida spp. are biofilm-forming pathogens commonly found colonizing central venous catheters and mechanical ventilation devices, being associated mainly with cases of pneumonia and bloodstream infection. The co-infection by these agents presents higher mortality rates when compared to those caused by a single microbial species. Therefore, it is crucial to analyze their interactions. A protocol was used to study the in vitro formation of mixed biofilms of Pseudomonas aeruginosa with Candida spp. and the effect of the Caspofungin, Micafungin, Amphotericin B and Polimixin was evaluated both for planktonic cells as well as in mono and polymicrobial biofilms. Biofilm biomass was quantified by crystal violet (CV) at 590 nm. In addition, the biofilms were scraped and the adherent cells were resuspended in PBS, diluted and plated for determination of cell viability. In the present study, Caspofungin and Micafungin showed to have an effect on planktonic cells and P. aeruginosa biofilm cells. In mixed biofilms, Caspofunina dose-dependently reduced the number of CFUs in Candida spp. in up to 5 Log and up to 2 Log the number of UFC P. aeruginosa, allowing to affirm that this antifungal has an effect on the reduction of polymicrobial biofilms of Candida spp. and P. aeruginosa. Similar results were found in treatment with Micafungin. These findings suggest that echinocandins, especially Caspofungin and Micafungin, may be used as an alternative in the treatment of polymicrobial infections involving bacteria and fungi. In addition, the antibiotic Polimixin B was effective in significantly reducing biomass and biofilm viability and presented action on the viability of Candida spp. in biofilms at concentrations greater than or equal to 8 g / mL. Caspofungin and Micafungin demonstrated a potential effect on disorganizing the biofilm structure, reducing its biomass and the fungal and bacterial cellular viability within the biofilms, proving its anti-biofilm effect. However, for the purposes of clinical therapy, additional "in vitro" and "in vivo" tests will be required to advance the results found herein and to define antimicrobial concentrations as well as the duration of treatment and administration forms required for the treatment of infections caused by polymicrobial biofilms.