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Thèse de Doctorat
DOI
https://doi.org/10.11606/T.42.2019.tde-08122021-121000
Document
Auteur
Nom complet
Luiz Ricardo Olchanheski
Unité de l'USP
Domain de Connaissance
Date de Soutenance
Editeur
São Paulo, 2019
Directeur
Jury
Araujo, Welington Luiz de (Président)
Lotufo, Leticia Veras Costa
Merzel, Valeria Maia
Sato, Maria Inês Zanoli
Titre en portugais
Diversidade e potencial do mobiloma presente ao longo da bacia do Rio Tietê.
Mots-clés en portugais
Antibióticos
Atividade antrópica
Metagenômica
Plasmídeos
Resumé en portugais
Sistemas de água doce são de importância vital para o sustento da população, além de contribuir com a produção agrícola e processos industriais. Alterações nas características físico-químicas em ambientes de água doce influenciam diretamente na diversidade bacteriana, porém ainda pouco se conhece quanto aos impactos no perfil funcional na comunidade bacteriana. Desta forma, um dos objetivos iniciais deste trabalho foi verificar a correlação dos perfis funcionais em dez amostras metagenômicas sequenciadas em trabalhos anteriores, com diferentes localizações geográficas e características físico-químicas contrastantes. A partir destas análises, foi possível verificar que a localização não está correlacionada com o perfil funcional da comunidade bacteriana. Além disto, a salinidade e a abundância de genes associados ao metabolismo do enxofre são as principais características relacionadas à variação do perfil funcional. Com o objetivo de analisar detalhadamente o perfil do mobiloma por meio de análises de metagenoma plasmidial, foi utilizado como objeto do presente estudo amostras de dois pontos do rio Tietê (TIET02400 e TITR02800). Este rio Tietê percorre 1.136 km no estado de São Paulo (Brasil), passando por diversas áreas preservadas da Mata Atlântica e regiões metropolitanas, como a cidade de São Paulo onde o rio recebe uma grande quantidade de poluentes industriais e esgoto doméstico. Os dois pontos amostrados são contrastantes quando IQA, sendo um classificado como ruim e outro como ótimo. Os genes presentes em plasmídeos no ponto com maior atividade antrópica foram relacionados às funções de transportadores transmembrana, bombas de efluxo, e genes que conferem resistência a compostos xenobióticos e metais pesados, que conferem vantagens adaptativas principalmente na presença de compostos tóxicos. Já no ponto com menor teor de poluentes, os genes de maior abundância estão envolvidos no transporte e assimilação de substâncias encontradas em baixas concentrações, como o fósforo. Os possíveis hospedeiros mais abundantes no ponto com IQA ótimo pertencem ao filo Cyanobacteria, o que justifica maio abundância de genes envolvidos com fotossíntese em plasmídeos. Ainda foi estimado a diversidade de genes que conferem resistência a antibióticos em quatro pontos (TIET02400, TIET02500, PATO02900 e TITR02800) contrastantes quando ao IQA. Foi observado maior abundância de genes que conferem resistência a multidrogas no ponto com IQA ótimo, e genes para resistência a sulfonamidas no ponto com IQA péssimo. Foi observado que a presença de metais pesados correlaciona com o aumento de genes que conferem resistência a antibióticos, sugerindo uma situação de co-seleção destes genes. As análises metagenômicas auxiliaram a compreender como as características ambientais podem modular a diversidade funcional na comunidade bacteriana, assim como determinam a pressão de seleção para genes passíveis de serem transferidos lateralmente, por meio de plasmídeos.
Titre en anglais
Diversity and potential of the mobilome present along the Tietê river basin.
Mots-clés en anglais
Anthropic activity
Antibiotics
Metagenomics
Plasmids
Resumé en anglais
Freshwater systems have vital importance for the livelihood of the population, in addition to contributing to agricultural production and industrial processes. Changes in physical-chemical characteristics in freshwater environments directly influence bacterial diversity, but little is known about the impacts on the functional profile in the bacterial community. Thus, one of the initial objectives of this work was to assess the correlation of the functional profiles in ten samples with different geographic positions and physical-chemical characteristics. From these analyzes, it was possible to verify that the geographical position is not correlated with the functional profile in the bacterial communities. In addition, salinity and genes for sulfur metabolism are the main characteristics that influence the functional profile. With the objective of analyzing the mobilome profile in detail using plasmid metagenome analysis, two points of the Tietê river were used as the object of study. The Tietê river, located in the state of São Paulo (Brazil), runs 1,136 km. Along this route, the river passes through several preserved areas of the Atlantic Forest and metropolitan regions, such as the city of São Paulo where the river receives a large amount of industrial pollutants and domestic sewage. The two points sampled are contrasting when compared to the IQA, one being classified as bad and the other as optimal. The genes present in plasmids at the point with greater anthropic activity were related to the functions of transmembrane transporters, efflux pumps, and genes that confer resistance to xenobiotic compounds and heavy metals, which confer adaptive advantages mainly the presence of toxic compounds. At the point of low pollutants, the genes of greater abundance are involved in the transport and assimilation of substances found in low concentrations, such as phosphorus. Also, with respect to the point with lower anthropogenic activity, the possible hosts more abundant belong to the phylum Cyanobacteria, which justifies the presence of more genes aimed at photosynthesis in plasmids. Also, in the Tietê river, it was possible to estimate the diversity of genes that confer resistance to antibiotics in four contrasting points when compared to the IQA. Higher abundance of genes that confer multidrug resistance at point with optimal IQA, and genes for resistance to sulfonamides at the point with poor IQA were observed. It was observed that the presence of heavy metals correlates with the increase of genes that confer resistance to antibiotics, determining a situation of co-selection of these genes. Metagenomic analyzes helped to understand how environmental characteristics modulate functional diversity in the bacterial community, as well as determine the selection pressure for laterally transferable genes, such as plasmids.
 
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Date de Publication
2022-01-07
 
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