O Alfa-Terpineol é um monoterpeno promissor para estudos relacionados à hipertensão devido a sua ação na redução da pressão arterial em ratos hipertensos (SABINO et al., 2013). O presente trabalho tem como objetivo analisar os possíveis mecanismos de ação do Alfa-Terpineol em célula de músculo liso A7r5 que possa explicar a ação hipotensora deste monoterpeno observada in vivo. Utilizamos cultura celular, análise de viabilidade celular e citotoxicidade do Alfa-Terpineol através do ensaio de MTT, extração de RNA e síntese de cDNA. Utilizamos o teste de viabilidade celular MTT nos tempos de 24, 48 e 72 horas de incubação. Os resultados demonstram que nos testes de citotoxicidade o Alfa-Terpineol promoveu morte celular somente na maior concentração 10-2 M, nos períodos de 24 e 48 horas. No período de 72 horas houve uma redução na viabilidade celular nas concentrações de 10-5 e 10-3 M e morte celular na concentração de 10-2 M. Para investigar as possíveis alterações no RNAm dos receptores de adenosina A2A foi realizado a extração de RNA total, que foi analisado por PCR em tempo real. Foi observado um aumento estatisticamente significativo na expressão de RNAm dos receptores de adenosina A2A no período de 6 horas para a concentração de Alfa-Terpineol de 10-8 M. Foi utilizado o ensaio In Cell Western Blotting para verificar a expressão desse receptor nos períodos de 6, 12, 24, 48 e 72 horas, sendo que o Alfa-Terpineol reduziu significativamente a quantidade do receptor em todos os períodos testados. Nossos dados mostram que o Alfa-Terpineol pode exercer ação nas células A7r5 envolvendo os receptores A2A de adenosina. Este estudo abre novas perspectivas de estudo do mecanismo de ação do Alfa-Terpineol no músculo liso.

Alpha-Terpineol is a promising monoterpene for studies related to hypertension due to its action in reducing blood pressure in hypertensive rats (SABINO et al., 2013). The present work aims to analyze the possible mechanisms of action of Alpha-Terpineol in A7r5 smooth muscle cells that may explain the hypotensive action of this monoterpene observed in vivo. We used cell culture, cell viability analysis and Alpha-Terpineol cytotoxicity using the MTT assay, RNA extraction and cDNA synthesis. We used the MTT cell viability test at 24, 48 and 72 hours of incubation. Results demonstrate that in the cytotoxicity tests, alpha-terpineol promoted cell death only at the highest concentration of 10-2 M, in the periods of 24 and 48 hours. Within 72 hours there was a reduction in cell viability at concentrations of 10-5 and 10-3 M and cell death at concentration of 10-2 M. To investigate possible changes in mRNA of adenosine A2A receptors, mRNA expression was evaluated by real-time PCR. A statistically significant increase in mRNA expression of adenosine A2A receptors in A7r5 cells was observed following 6 hour-treatment with Alpha-Terpineol concentration of 10-8 M. Using in Cell Western Blotting assay the expression of A2a receptor was significantly reduced by Alpha-Terpineol at all periods tested. Our data show that Alpha-Terpineol action on smooth muscle cells may involve adenosine A2A receptors and open new perspectives for studying its mechanism of action in these cells.