Diversos estudos mostram que a presença do diabete e de condições nutricionais inadequadas no organismo materno podem levar a alterações nas funções reprodutivas dos descendentes. No entanto, os efeitos da associação de ambos os fatores maternos na reprodução dos descendentes ainda não foram explorados. Além disso, a leptina tem um papel fundamental na modulação da função reprodutiva e seus níveis séricos estão alterados na presença de alterações metabólicas e nutricionais maternas. No entanto, também não há estudos na literatura sobre os efeitos da leptina no comportamento sexual e trato reprodutor de descendentes de ratas com hiperglicemia moderada associada à nutrição inadequada durante a prenhez e a lactação. Dessa maneira, nosso objetivo foi avaliar os efeitos da infusão central crônica de leptina em parâmetros reprodutivos de descendentes machos de ratas com hiperglicemia moderada com nutrição inadequada durante a prenhez e a lactação. Para isso foram utilizadas fêmeas Sprague-Dawley distribuídas em dois grupos no dia de prenhez (DP) 0: Controle, que recebeu dieta padrão, e Dieta que, além da dieta padrão, recebeu snacks (batata chips e solução de sacarose 1,5% com sabor artificial de frutas vermelhas do DP 0 ao dia de lactação (DL) 14. No DP 7, a hiperglicemia moderada durante a prenhez foi induzida por meio da administração intraperitoneal de 35 mg/ kg de streptozotocin diluído em tampão citrato 0,1 M e pH 4,5 em parte das fêmeas prenhes que compunham os dois grupos. Dessa forma, formaram-se os grupos: Controle, Controle-Dieta, STZ e STZ-Dieta. Por volta do DP 21, as fêmeas pariram e as ninhadas foram padronizadas para 4 machos e 4 fêmeas no dia pós-natal (DPN) 1. Por volta do DPN 82, dois machos de cada ninhada passaram pela cirurgia de estereotaxia para implantação de uma cânula no ventrículo lateral cerebral conectada a uma bomba osmótica para liberação de salina ou leptina (1 µg/dia) durante 7 dias consecutivos. Dessa forma, os grupos experimentais dos descendentes foram formados de acordo com o metabolismo materno (normo ou hiperglicêmica), nutrição materna (dieta padrão ou dieta padrão + snacks) e tratamento (salina ou leptina). Após o fim da infusão ICV crônica, os animais foram submetidos aos testes de preferência sexual com um macho e uma fêmea receptiva, seguido pelo protocolo com uma fêmea receptiva e uma não-receptiva. No dia seguinte, foi realizado o comportamento sexual dos animais. Após o fim das avaliações comportamentais, os animais foram anestesiados e mortos para a coleta das estruturas do trato reprodutor. Todos os procedimentos foram aprovados pela Comissão de Ética no Uso de Animais CEUA- IBB (protocolo 1134). Nossos resultados mostraram que a presença da hiperglicemia materna e a dieta inadequada foram capazes de modificar o trato reprodutor e comportamento sexual dos descendentes machos. No entanto, não houve maiores repercussões da associação da hiperglicemia à dieta inadequada nos parâmetros avaliados. Além disso, apesar de o tratamento central com leptina também ter modificado parâmetros do trato reprodutor e ter causado alterações na preferência sexual, não houve interação da infusão central de leptina com o estado metabólico ou nutricional materno. Em conclusão, ao contrário da hipótese inicial, a associação da hiperglicemia materna moderada com a nutrição inadequada não refletiu em maiores repercussões na reprodução dos descendentes, sejam comportamentais ou morfológicas. Tanto a hiperglicemia materna quanto a dieta modificaram aspectos do comportamento sexual e dos órgãos do trato reprodutor dos descendentes, sem modificar a preferência sexual. A ação central da leptina ocorreu de forma independente dos fatores maternos estudados, não estando sua ação associada à melhora, ou não, das alterações reprodutivas de descendentes de mães hiperglicêmicas ou que ingeriram uma dieta inadequada durante a prenhez e lactação. Cabe ressaltar que diferentes amostras biológicas foram coletadas e armazenadas durante o presente estudo para futura avaliação dos níveis séricos de testosterona, análise da histologia testicular e contagem espermática. Essas avaliações podem evidenciar alterações e auxiliar na compreensão de forma mais completa das repercussões dos fatores estudados para a reprodução dos descendentes.

Several studies show that the presence of maternal diabetes and inadequate nutritional conditions can lead to changes in the offspring reproductive functions. However, the effects of the association of both maternal factors in the offspring reproduction has not yet been explored. Furthermore, leptin has a fundamental role in the modulation of the reproductive function and its serum levels are altered in the presence of maternal metabolic and nutritional impairments. However, there are no studies in the literature regarding the effects of leptin on the sexual behavior and reproductive tract of offspring of dams with hyperglycemia and inadequate diet during pregnancy and lactation. Thus, our aim was to evaluate the effects of chronic central leptin infusion on the male offspring reproductive parameters of dams with mild hyperglycemia and inadequate nutrition during pregnancy and lactation. To do so, pregnant Sprague-Dawley female rats were divided into two groups on pregnancy day (PD) 0: Control, which received standard diet, and Diet which, in addition to the standard diet, received snacks (potato chips and 1.5% sucrose solution with artificial red fruit flavor from PD 0 to lactation day (LD) 14. On PD 7, mild hyperglycemia was induced by intraperitoneal administration of 35 mg/ kg of streptozotocin (STZ) diluted in 0.1 M citrate buffer and pH 4.5 in part females from both experimental groups. Thus, the following groups were formed: Control, Control-Diet, STZ and STZ-Diet. Around PD 21, the females gave birth and, on postnatal day (PND) 1 the litters were culled to 4 males and 4 females. Around DPN 82, two males from each litter underwent stereotaxic surgery for implantation of a cannula in the lateral cerebral ventricle connected to an osmotic pump releasing saline or leptin (1 µg/day) for 7 consecutive days. Thus, offspring were divided into experimental groups according to maternal metabolism (normal or hyperglycemic), maternal nutrition (standard diet or standard diet + snacks) and treatment (saline or leptin). The day following the end of the chronic ICV infusion, the sexual preference test was conducted with a receptive male and a receptive female, followed by the protocol with one receptive and one non-receptive female. The next day, the sexual behavior analysis was performed. After the end of the behavioral assessments, the animals were anesthetized, killed and the reproductive tract was evaluated. All procedures were approved by the Ethics Committee on Animal Use CEUA-IBB (protocol 1134). Our results showed that the presence of maternal hyperglycemia and inadequate nutrition were able to modify the reproductive tract and sexual behavior of male offspring. However, there were no major repercussions of the association of maternal hyperglycemia with inadequate nutrition in the evaluated parameters. Furthermore, although central leptin treatment modified some aspects of the reproductive tract and changed the sexual preference, there were no further effects associated with maternal metabolic or nutritional status. In conclusion, contrary to the initial hypothesis, the association of maternal mild hyperglycemia and inadequate nutrition did lead to further impairments offspring behavioral or morphological reproductive aspects. Both maternal hyperglycemia and nutrition changes some aspects of offspring sexual behavior and reproductive tract, without affecting sexual preference. Plus, those changes were not modulated by leptin central treatment. It is noteworthy that several biological samples were collected and stored during the present study for future assessment of serum testosterone levels, testicular histological analysis and sperm count. The results obtained with the evaluation of those parameters can help to provide a broader view of the effects of the studied maternal factors and central leptin to offspring reproduction.