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Doctoral Thesis
DOI
https://doi.org/10.11606/T.17.2006.tde-25012024-181912
Document
Author
Full name
Ailton José Barbosa
Institute/School/College
Knowledge Area
Date of Defense
Published
Ribeirão Preto, 2006
Supervisor
Committee
Júnior, Orlando de Castro e Silva (President)
Tucci Junior, Silvio
Curti, Carlos
Medeiros, Aldo da Cunha
Ramalho, Leandra Naira Zambelli
Title in Portuguese
Alterações mitocondriais do fígado remanescente pós-hepatectomia a 70%
Keywords in Portuguese
Hepatectomia parcial
Laser
Potencial de membrana mitocondrial
Regeneração hepática
Respiração mitocondrial
Abstract in Portuguese
No presente estudo analisou-se a função mitocondrial do remanescente hepático após ressecção hepática a 70% e os possíveis benefícios da bioestimulação a LASER em tempos pré-fixados. Este estudo foi realizado em duas etapas, na 1ª etapa, foram utilizados 96 ratos da linhagem Wistar, divididos em 16 grupos (n=6, em cada grupo), dentro dos critérios aprovados pela comissão de ética da FMRP-USP em experimentação animal. Os animais foram submetidos a hepatectomia parcial (HP) a 70%, posteriormente colhido o remanescente hepático (RH) em tempos seriados de eutanásia (C=0',2',5',10',15',30', 1h, 2h, 4h, 6h,12h, 1dia, 2dias, 3 dias, 6 dias, 15 dias) e enviados para estudos da respiração mitocondrial. Foram usados como parâmetros os estados 3, 4, RCR, PM e Swelling. Na segunda etapa utilizou-se 30 ratos divididos em 5 grupos (n=6) dentro dos padrões anteriores, desenvolvendo a mesma técnica. Mediante os resultados obtidos na 1ª etapa, selecionou-se os tempos C=0', 2', 4h, 6h e 24h para usar a bioestimulação a LASER num comprimento de onda de 660 nm com potência de 30 mw, em cinco pontos distintos no RH por 30 segundos, na dose 22,5 J/cm3 em cada um deles. Os resultados dos vários grupos foram analisados e comparados por testes não paramétricos de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney. As diferenças foram significantes para p<0.05. Com relação ao estado 3, o LASER provocou uma significativa diminuição da respiração mitocondrial após quatro horas, o que não ocorreu após seis horas de hepatectomia. O LASER não alterou o estado 4 da respiração mitocondrial em relação ao controle e mesmo reduzindo os níveis de RCR não causou desacoplamento mitocondrial. Concluiu-se que, a sobrecarga metabólica do RH na fase aguda da regeneração hepática, foi significativa no intervalo entre quatro e seis horas, tendendo a uma estabilização subseqüente. Numa análise global, o LASER, na dose utilizada e nas condições experimentais do presente estudo, não induziu lesão adicional ao FR e parece ter retardado o surgimento do estresse metabólico hepatocelular do fígado remanescente. Na seqüência, outros estudos deverão ser programados para se estabelecer com melhor precisão os eventos metabólicos que ocorrem pós-hepatectomia parcial e a possível ação da luz LASER sobre o fígado, após as ressecções hepáticas parciais.
Title in English
Mitochondrial changes in the remaining liver post-hepatectomy 70%
Keywords in English
Hepatic regeneration
Laser
Mitochondrial breathing
Mitochondrial membrane potential
Partial hepatectomy
Abstract in English
ln the present study the mitochondrial function of the hepatic remainder (HR) after 70% hepatic resection was analyzed, as well as the possible benefits of LASER biostimulation in pre-fixed time. This study was accomplished in two stages: in the 1st stage 96 Wistar rats were used, according to the standards approved by the ethics commission of animal experimentation, from FMRP-USP, divided ín 16 groups (n=6 in each group). The animals were submitted to partial hepatectomy (PH) at 70%, the hepatic remainder (HR) being subsequently taken up in seriate periods of euthanasia (C=0',2',5',10',15',30'. 1h.2h.4h,6h, 12h, 1 day, 2 days, 3 days, 6 days, 15 days) and sent for mitochondrial breathing studies. As parameters, states 3, 4, RCR, PM, and Swelling were used. ln the 2nd stage 30 rats were used, divided in 5 groups (n=6 in each group) according to the foregoing standards, developing the same technique. By means of the results obtained in the first stage, times C=0, 2', 4h, 6h and 24h were selected to be used in LASER biostimulation, at a 660nm wavelength with a 30mw potency in five distinct spots of the HR for 30 seconds, ata 22,5J/cm3 dose in each one of them. The results of the several groups were analyzed and compared by non-parametric tests from Kruskal-Wallis and Mann-Whitney. Differences were significant for p<0.05. Relating to stage 3, the LASER provoked a significative reduction in mitochondrial breathing after four hours, which did not occur after six hours of hepatectomy. LASER did not alterate stage 4 of mitochondrial breathing compared to control, and even when RCR levels were reduced it didn't cause mitochondrial uncoupling. The conclusion was that the HR metabolic overload in the acute phase of hepatic regeneration was significant in the four-to-six hour interval, with a subsequent stabilization. ln an overall analysis, LASER, in the used dose and experimental conditions of the present study, did not induce additional injury to the remaining liver (RL) and seems to have delayed the arising of the hepatocellular metabolic stress in the RL. ln sequence, other studies should be scheduled to establish with more acute precision the metabolic events that occur after partial hepatectomy and the possible effect of LASER light in the liver, after the partial hepatic resections.
 
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Publishing Date
2024-01-25
 
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