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Tese de Doutorado
DOI
https://doi.org/10.11606/T.17.2004.tde-02082023-111825
Documento
Autor
Nome completo
Vander Baptista
E-mail
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
Ribeirão Preto, 2004
Orientador
Banca examinadora
Varanda, Wamberto Antonio (Presidente)
Castro, Newton Gonçalves de
Cassola, Antonio Carlos
Machado, Benedito Honório
Prado, Wiliam Alves do
Título em português
O sítio da glicina no receptor NMDA de neurônios do NTS subpostremal
Palavras-chave em português
Eletrofisiologia
NTS
Receptor NMDA
Sítio da glicina
Resumo em português
O núcleo do trato solitário (NTS), localizado no bulbo dorso medial, é o local do primeiro contato sináptico de várias fibras aferentes viscerais, incluindo aquelas dos sistemas cardiovascular, respiratório, gustatório e gastrointestinal. O NTS subpostremal, região do NTS comissural que se estende do óbex até a ponta posterior da área postrema, tem importante participação na integração da informação aferente cardiopulmonar. Os receptores glutamatérgicos, NMDA (ácido - N- metil-D- aspártico) e não-NMDA, e GABAérgico, GABAA (receptores do tipo A do ácido - γ - amino butírico) são os principais envolvidos na neurotransmissão no NTS, apesar de haver várias outras substâncias neurotransmissoras/moduladoras identificadas dentro do núcleo. O complexo canal-receptor NMDA necessita da ligação de dois agonistas, glutamato e glicina, para sua abertura. Enquanto o glutamato é considerado o agonista propriamente dito, a glicina, tida como co-agonista, parece ter um efeito modulatório, dependendo de sua concentração na fenda sináptica. Se a constante de dissociação da glicina do seu sítio no receptor NMDA for menor que a sua concentração na fenda sináptica, o sítio estará saturado e a modulação da neurotransmissão glutamatérgica NMDA pela glicina exógena, ou por aquela liberada sinapticamente, não será possível. O nível de saturação do sítio da glicina varia nas diferentes regiões do SNC e depende fundamentalmente (1) da expressão dos transportadores de glicina (GLYT1/GLYT2) que podem manter a concentração deste aminoácido no microambiente da fenda sináptica NMDA em baixos níveis e (2) das subunidades que compõem o receptor NMDA. Neste trabalho nós investigamos a transmissão sináptica no NTS subpostremal e, particularmente, se o sítio da glicina nos receptores NMDA é ou não saturado de maneira que possamos inferir se a glicina pode atuar como um modulador da neurotransmissão NMDA. Empregamos a técnica de patch clamp em fatias transversais do tronco encefálico de ratos Wistar de 30-35 dias de vida. Os resultados obtidos mostram que: (1) as correntes pós-sinápticas espontâneas e evocadas por estimulação do trato solitário são resultado da ativação de receptores NMDA, não-NMDA e GABAA, (2) os receptores NMDA e não-NMDA devem estar co-localizados, (3) os receptores NMDA são fracamente bloqueados pelo Mg2+ em voltagens próximas do potencial de repouso, sugerindo uma importante participação destes receptores na sinalização sináptica, (4) além do Cl-, outro íon, talvez o bicarbonato, permeia o complexo canal-receptor GABAA e (5) o sítio da glicina no receptor NMDA não se encontra saturado, sugerindo que a glicina pode atuar como um modulador da neurotransmissão glutamatérgica, via receptores NMDA, no NTS subpostremal.
Título em inglês
The glycine site on the NMDA receptor of subpostremal NTS neurons
Palavras-chave em inglês
Electrophysiology
Glycine site
NMDA receiver
NTS
Resumo em inglês
The nucleus of the tractus solitarius (NTS), located in the medulla oblongata, is the first point of synaptic contact for several visceral afferent fibers, including those from the cardiovascular, respiratory and gastrointestinal systems. The subpostremal NTS, the region of the comissural NTS extending from the obex to the posterior tip of the area postrema, plays an important role in the integration of the cardiopulmonary afferent information. Although several neurotransmitter/modulator substances have been identified in the nucleus, glutamatergic, NMDA and non-NMDA, and GABAergic, GABAA, are the main receptors involved in the neurotransmission. The NMDA receptor channel complex needs the binding of two agonists, glutamate and glycine, for its efficient opening. While the glutamate plays the neurotransmitter role, glycine appears to play a more modulatory function depending on its concentration at the synaptic cleft. If the concentration of glycine is higher than the glycine dissociation constant at its site on the NMDA receptor, this site will be saturated and the modulation of the NMDA response by exogenous or synaptically released glycine is not possible. The saturation level of the glycine-binding site varies among different CNS regions and depends fundamentally on (1) expression of the glycine transporters (GLYT1/GLYT2), which can maintain the concentration of glycine in the NMDA synapse at low levels and (2) the type of NMDA receptor subunits. In this work we have investigated the synaptic transmission in the subpostremal NTS and, particularly, if the glycine biding site of the NMDA receptor is saturated or not, so we could infer if glycine could act as a modulator of the NMDA neurotransmission. We have applied the patch clamp technique in brainstem transversal slices of 30-35 days old Wistar rats. The results show that: (1) both the spontaneous postsynaptic currents and those evoked by solitary tract stimulation are due to NMDA, non-NMDA and GABAA receptors activation, (2) The NMDA and non-NMDA receptors are co-localized at the same synaptic site, (3) the NMDA receptors are weakly blocked by Mg2+ at voltages close to the resting membrane potential, suggesting that this receptor can play an important role in synaptic signaling, (4) besides Cl-, another ion, possibly bicarbonate, permeates the channel-receptor GABAA complex and (5) the glycine binding site of the NMDA receptor is not saturated, suggesting that glycine can act as a modulator of the excitatory NMDA transmission in the subpostremal NTS.
 
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Data de Publicação
2023-08-02
 
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