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Tese de Doutorado
DOI
https://doi.org/10.11606/T.10.2020.tde-10122019-091349
Documento
Autor
Nome completo
Juliana Junqueira Moreira
E-mail
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
São Paulo, 2018
Orientador
Banca examinadora
Baccarin, Raquel Yvonne Arantes (Presidente)
Aguiar, Jair Adriano Kopke de
Brossi, Patricia Monaco
Gomes, Cristina de Oliveira Massoco Salles
Michelacci, Yara Maria Corrêa da Silva
Título em português
Avaliação do queratam sulfato e ácido hialurônico presentes no líquido sinovial como biomarcadores das principais enfermidades articulares em equinos
Palavras-chave em português
Equino
Fratura
Liquido sinovial
Osteoartrite
Osteocondrose
Resumo em português
A alta demanda do sistema musculoesquelético dos equinos é importante fator de risco no surgimento da claudicação, uma vez que as articulações estão sujeitas as forças compressivas e de cisalhamento. Visto que a cartilagem é um tecido aneural, a dor só é desencadeada quando a enfermidade atinge a membrana sinovial ou o osso subcondral, tornando a gravidade das artropatias substancial antes da manifestação clínica. Assim, há a necessidade de diagnósticos preventivos e não apenas comprobatórios da extensão da lesão. Neste contexto, os biomarcadores do liquido sinovial (LS) auxiliam no reconhecimento precoce do processo de quebra de homeostasia articular. O desenvolvimento de diagnósticos moleculares específicos e biomarcadores preditivos como modelos para personalizar a medicina ortopédica equina têm ganhado ênfase; o objetivo é o desenvolvimento de diagnósticos não invasivos, com boa repetibilidade e fácil reprodução e com alta especificidade e sensibilidade, mesmo nos estágios mais iniciais das doenças articulares. O objetivo deste estudo foi caracterizar o comportamento dos principais biomarcadores do LS nas diferentes enfermidades articulares equinas. O LS de 166 articulações doentes foi coletado de 117 animais diagnosticados com fratura intra-articular, osteoartrite leve (OA1), moderada (OA2), severa (OA3) ou osteocondrose (OC). Como controle, foram coletadas 51 articulações metacarpofalangeanas e tibiotarsicas de 16 equinos hígidos sem doença articular. Imediatamente após a coleta foi realizada a contagem de células nucleadas, e o sobrenadante resultante da centrifugação do LS foi congelado a -80°C para quantificação da interleucina 1 (IL-1β), interleucina 6 (IL-6), fator de necrose tumoral (TNFα), interleucina 10 (IL-10), prostaglandina E2 (PGE2), queratam sulfato (KS), ácido hialurônico (AH) e condroitim sulfato (CS), além da determinação do peso molecular do AH. Altas concentrações de IL-1β ocorreram nos grupos OA1, OA2 e OC. As concentrações de TNFα foram maiores nos grupos Fraturas e OA. Tanto o grupo Fraturas quanto o grupo OA3 tiveram alta concentração de PGE2. O grupo controle teve concentração de KS superior aos grupos Fraturas, OA1 e OA3. A porcentagem de AH de alto peso molecular foi menor no grupo OA3. Pode-se concluir que baixa concentração de KS e quebra da molécula de AH ocorrem em doenças com comprometimento cartilagíneo.
Título em inglês
Evaluation of keratan sulfate and hyaluronic acid in the synovial fluid as biomarkers of the equine joint disease
Palavras-chave em inglês
Equine
Fracture
Osteoarthritis
Osteochondrosis
Synovial fluid
Resumo em inglês
The high demand of the musculoskeletal system of the horses is an important risk factor in the onset of claudication, since the joints are subject to compressive and shear forces. Since cartilage is an aneuronal tissue, pain is only triggered when the disease reaches the synovial membrane or the subchondral bone, making the severity of arthropathies substantial prior to clinical manifestation. Therefore, there is a need for preventive diagnoses and not just to confirm the extent of the lesion. In this context, the biomarkers of synovial fluid (SF) could help in the early recognition of the process of joint homeostasis breakdown. The development of specific molecular diagnoses and predictive biomarkers as models for customizing orthopedic equine medicine have gained emphasis. The aim this study is characterize the behavior of the main biomarkers of SF in the different equine joint disease. In this context, the objective of this study was to characterize the behavior of the main biomarkers of SF in the different equine joint diseases. The SF of 166 diseased joints was collected from 117 animals diagnosed with stress fracture (F), mild osteoarthritis (OA1), moderate (OA2), severe (OA3) or osteochondrosis (OC). As a control, 51 metacarpophalangeal and tibiotarsal joints were collected from 16 healthy horses without any joint disease. White blood cells count were performed immediately after collection, and the supernatant resulting from SF centrifugation were frozen at -80°C for later quantification of interleukin 1 (IL-1β), interleukin 6 (IL-6), tumor necrosis factor (TNFα), interleukin 10 (IL-10), prostaglandin E2 (PGE2), keratam sulfate (KS), hyaluronic acid (HA) and chondrocyth sulfate (CS), as well as molecular weight determination of HA. Higher IL-1β concentration occurs in the OA1, OA2 and OC groups. The Fractures and OA groups had higher TNFα concentration. Both the Fractures and OA3 groups had high PGE2 concentration. The control group had higher KS concentration than the Fractures, OA1 and OA3 groups. The percent of high molecular weight AH (>2000 kDa) was lower in the OA3 group. We conclude that low KS concentration and breakdown of the AH molecule occur in the joint disease with loss of cartilage.
 
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Data de Publicação
2020-04-24
 
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