Os tripanossomatídeos são protozoários de grande importância para saúde pública, por causarem enfermidades como as leishmanioses e tripanossomoses no ser humano e em diferentes espécies animais. Com o objetivo de identificar a ocorrência de tripanossomatídeos em ruminantes de áreas endêmicas para leishmanioses do estado de São Paulo foram avaliados 111 bovinos, 122 ovinos e 36 caprinos nas cidades de Ilha Solteira, Andradina e Pirassununga. Os animais passaram por exames clínicos e amostras de sangue, suabe conjuntival e suabe oral foram coletadas e avaliadas por testes sorológicos, moleculares e parasitológicos. Pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), foram detectados anticorpos anti-Leishmania em 57,6% (64/111) dos bovinos, 24,6% (30/122) dos ovinos e 66,7% (24/36) dos caprinos, com títulos variando de 1:40 a 1:160 para bovinos e caprinos e de 1:40 a 1:640 em ovinos. No teste rápido de imunocromatografia para detecção de anticorpos anti-Trypanosoma vivax, dos 38 bovinos testados 58% (22/38) foram positivos, comprovando a exposição desses animais a esses tripanossomatídeos. Nas análises moleculares, pela Nested-PCR de ITS1, foi detectada a presença de DNA de tripanossomatídeos em 23,4% (26/111) das amostras de sangue e 19,8% (22/111) das amostras de suabe conjuntival de bovinos, 29,5% (36/122) das amostras de sangue, 14,7% (18/122) das amostras de suabe conjuntival e 12,3% (8/65) das amostras de suabe oral de ovinos e 27,8% (10/36) amostras de sangue e 5,5% (2/36) amostras de suabe conjuntival de caprinos. As amostras de sangue e suabe conjuntival de bovinos positivas na Nested-PCR de ITS1 foram testadas com a PCR tendo o kDNA de Leishmania spp. como alvo e foram negativas. Todas as 111 amostras de sangue bovino também foram testadas para T. vivax com primers específicos e foram negativas. O sequenciamento de amostras positivas pelo ITS1 das 3 espécies de ruminantes estudadas mostrou similaridade com DNA de Leishmania spp. e Trypanosoma spp., mas não foi possível avaliar a proximidade filogenética das amostras similares a Leishmania spp. devido à baixa qualidade do sequenciamento genético, de tal forma que outros alvos moleculares são necessários para elucidar corretamente a espécie infectante. Os ovinos e caprinos não apresentavam alterações clínicas no momento da coleta e foram negativos na hemocultura e pesquisa de hemoparasitos. Para os bovinos nenhuma das amostras de sangue foi positiva por exames parasitológicos, mas em 9 amostras houve o crescimento de parasitos na hemocultura. Um total de 11 bovinos da cidade de Ilha Solteira-SP foram positivos na PCR com primers específicos para Trypanosoma theileri realizada em amostras de hemocultura e sangue (6 animais), apenas de hemocultura (3 animais) e apenas em amostras de sangue (2 animais), nenhum desses animais apresentava alterações clínicas ou hematológicas sugestivas da ocorrência de doença. Submetidos ao sequenciamento, a análise filogenética de 2 isolados demonstrou que estes pertencem à mesma linhagem de T. theileri Tth1 já identificada em bovinos no Brasil, Equador, Estados Unidos, Sri-Lanka, Filipinas e Vietnã.

Trypanosomatids are protozoa of great importance for public health, due to its role as causative agents of diseases such as leishmaniasis and trypanosomosis in humans and different animal species. With the purpose of identifying the occurrence of trypanosomatids in ruminants from endemic areas for leishmaniasis in the state of São Paulo, 111 cattle, 122 sheep and 36 goats were evaluated in the cities of Ilha Solteira, Andradina and Pirassununga. The animals have passed through clinical examinations and blood samples, conjunctival and oral swabs were collected and evaluated by serological, molecular and parasitological tests. Using the Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT), anti-Leishmania antibodies were detected in 57.6% (64/111) of cattle, 24.6% (30/122) of sheep and 66.7% (24/36) of goats, with titre varying from 1:40 to 1:160 for cattle and goats and from 1:40 to 1:640 in sheep. In the rapid immunochromatography test for detection of anti-Trypanosoma vivax antibodies, of the 38 cattle tested, 58% (22/38) were positive, proving the exposure of these animals to these trypanosomatids. In molecular analyses, using ITS1 Nested-PCR, the presence of trypanosomatid DNA was detected in 23.4% (26/111) of blood samples and 19.8% (22/111) of conjunctival swab samples from cattle, 29.5% (36/122) of blood samples, 14.7% (18/122) of conjunctival swab samples and 12.3% (8/65) of oral swab samples from sheep and 27.8 % (10/36) blood samples and 5.5% (2/36) conjunctival swab samples from goats. Blood and conjunctival swab samples from bovines positive in ITS1 Nested-PCR were tested with PCR containing Leishmania spp. kDNA as a target and were negative. All 111 bovine blood samples were also tested for T. vivax with specific primers and were negative. Sequencing of ITS1 positive samples from the 3 ruminant species studied showed similarity with DNA from Leishmania spp. and Trypanosoma spp., but it was not possible to evaluate the phylogenetic proximity of the samples that showed similarity with Leishmania spp. because of the low quality of genetic sequencing, thus other molecular targets are necessary to correctly elucidate the infectious species. The sheep and goats showed no clinical changes at the time of collection and were negative in blood culture and parasitological test. For cattle, no blood sample was positive by parasitological tests, but in 9 samples there was parasite growth in the blood culture. A total of 11 cattle from the city of Ilha Solteira-SP were positive in PCR with specific primers for Trypanosoma theileri carried out on blood and blood culture samples (6 animals), only on blood cultures (3 animals) and only on blood samples (2 animals) these animals did not present clinical or hematological changes suggestive of disease occurrence. Submitted to sequencing, phylogenetic analysis of 2 isolates showed to belong to the same lineage of T. theileri Tth1 already identified in cattle in Brazil, Ecuador, United States, Sri-Lanka, Philippines and Vietnam.