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Master's Dissertation
DOI
https://doi.org/10.11606/D.10.2020.tde-05122019-132714
Document
Author
Full name
Arthur Rodrigues Martins
E-mail
Institute/School/College
Knowledge Area
Date of Defense
Published
São Paulo, 2019
Supervisor
Committee
Fratini, Paula (President)
Ferreira, Christina Ramires
Nogueira, Renata Avancini Fernandes
Title in Portuguese
Recelularização de derme de rato Wistar
Keywords in Portuguese
Descelularização
Matriz extracelular
Pele
Recelularização
Scaffold
Abstract in Portuguese
As lesões de pele são normais à todas as espécies, independentemente de sexo ou idade. A pele, por ser o maior órgão do corpo e servir de barreira primária às agressões químicas, físicas e biológicas do meio, é a primeira a sofrer lesões e as consequências das mesmas. Em animais estas lesões podem ser devido à brigas, caças e/ou predações e, também, assim como em humanos se tem uma causa muito comum de lesões dérmicas que são queimaduras e carcinomas. Tendo em vista novas técnicas da bioengenharia tecidual, para a recomposição dessas lesões, estudos com resultados significativamente têm se mostrado promissores de formulações de scaffolds biológicos acelulares a partir da descelularização de tecidos. A descelularização tem sua comprovação por uma variada gama de testes como microscopia eletrônica de varredura e testes de DNA genômico residual. Posteriormente o tecido pode passar pelo processo de recelularização utilizando células de interesse, até mesmo do animal que irá receber este tecido, diminuindo os riscos de rejeição e melhorando a resposta ao transplante tecidual. Assim, este projeto visou a realização de testes de descelularização do tecido com a utilização de variados meios químicos e físicos e posteriores testes de eficácia de protocolo seguida da esterilização através desidratação do material e o estabelecimento de um protocolo de recelularização de um scaffold biológico descelularizado oriundo de derme de rato Wistar utilizando nos testes fibroblastos murinos e células-tronco mesenquimais oriundas de tecido adiposo canino com incubação durante 7 dias. Após testes de eficácia a recelularização do tecido foi comprovada por ensaios de Imunofluorescência e microscopia eletrônica de varredura onde pode-se observar a aderência das células no scaffold biológico comprovando a eficácia dos protocolos utilizados.
Title in English
Wistar mouse dermis recellularization
Keywords in English
Decellularization
Extracellular matrix
Recellularization
Scaffold
Skin
Abstract in English
Skin lesions are normal to all species, regardless of gender or age. The skin, being the largest organ in the body and serving as a primary barrier to the chemical, physical and biological aggressions of the environment, is the first to suffer injuries and their consequences. In animals these injuries may be due to fighting, hunting and / or predation and also as well as in humans there is a very common cause of dermal lesions which are burns and carcinomas. Considering new techniques of tissue bioengineering, for the recomposition of these lesions, studies with significant results have shown promising formulations of acellular biological scaffolds from tissue decellularization. Decellularization is proven by a wide range of tests such as scanning electron microscopy and residual genomic DNA testing. Subsequently the tissue may undergo the recellularization process using cells of interest, even from the animal receiving the tissue, reducing the risk of rejection and improving the response to tissue transplantation. Thus, this project aimed to perform tissue decellularization tests using various chemical and physical media and subsequent protocol efficacy tests followed by sterilization through material dehydration and the establishment of a recellularization protocol of a decellularized biological scaffold from of Wistar rat dermis using murine fibroblasts and mesenchymal stem cells from canine adipose tissue incubated for 7 days. After efficacy tests, the recellularization of the tissue was confirmed by immunofluorescence assays and scanning electron microscopy where the adherence of cells in the biological scaffold can be observed, proving the effectiveness of the protocols used.
 
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Publishing Date
2020-04-15
 
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