A sacarose é um tipo de açúcar formado durante a fotossíntese das plantas e é armazenada no vacúolo das células dos tecidos não fotossintéticos, fornecendo uma fonte de energia essencial para realizar processos fundamentais no crescimento da planta. A sacarose é principalmente extraída da cana-de-açúcar, devido à sua capacidade de armazenar grandes quantidades de sacarose nos entrenós dos seus colmos, de onde é extraída. A cana-de-açúcar é considerada uma fonte de alimento e de energia renovável e o seu cultivo resulta em um aumento na economia convertendo a indústria sucroalcooleira como um dos setores mais modernos e competitivos no mundo. Brasil tem sido líder mundial em produção durante vários anos consecutivos e devido à grande importância econômica, este projeto visa ao entendimento genético dos genes que dão lugar à expressão da enzima, sacarose 6-fosfato fosfohidrolase (S6PP), responsável pela liberação da sacarose no último passo da síntese. Pretende-se entender a função de dois possíveis genes homólogos S6PP identificados no genoma da cultivar hibrida de Saccharum spp., variedade R570, onde verificou-se a existência de uma duplicação gênica em tandem (S6PP.1 e S6PP.2) compartilhada com outros genomas de plantas, que resulta na predição de transcrição de dois peptídeos iguais. A relevância que introduzimos neste trabalho é a proposta de uma nova isoforma desse gene nunca evidenciada em outros trabalhos, que sugere a conjugação destas duas sequencias em tandem, evento possivelmente decorrente de splicing alternativo, resultando em um único transcrito (S6PP_2D) contendo os dois domínios da S6PP, surgindo a hipótese de que Saccharum spp. apresenta duas variantes do gene S6PP. É por isso que este trabalho compreende o estudo molecular dos genes S6PP em diferentes tecidos de variedades de cana-de-açúcar ao longo do tempo, onde foi evidenciada a expressão do transcrito da versão inédita S6PP_2D proposta neste trabalho, sugerindo que atua na liberação da sacarose durante a síntese e durante o armazenamento. Foi estabelecida a função bioquímica das proteínas sintetizadas em organismos heterólogos.