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Dissertação de Mestrado
DOI
https://doi.org/10.11606/D.87.2015.tde-04122015-135837
Documento
Autor
Nome completo
Roberto Tadashi Kodama
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
São Paulo, 2015
Orientador
Banca examinadora
Portaro, Fernanda Calheta Vieira (Presidente)
Albuquerque, Cristina Northfleet de
Tashima, Alexandre Keiji
Título em português
Análise dos constituintes de baixa massa molecular de quatro venenos do gênero Bitis e suas atividades biológicas.
Palavras-chave em português
Bitis
Enzima conversora de angiotensina I
Hipotensão
Peptídeo potencializador de bradicinina (BPP)
Peptídeo rico em prolina
Veneno
Resumo em português
Na África subsaariana, as serpentes do gênero Bitis são de extrema importância, pois suas vítimas apresentam sintomas como dano local, hemorragia e uma severa hipotensão. Este trabalho identificou moléculas capazes de inibir a atividade da enzima conversora de angiotensina I (ECA) presentes no veneno de quatro serpentes do gênero Bitis. Para isto, as porções de baixa massa molecular desses 4 venenos foram fracionadas em RP-HPLC e as frações com boa inibição sobre a atividade da ECA foram analisadas por espectrometria de massas. Foram identificados 34 oligopeptídeos ricos em prolina (PRO), sendo 8 sintetizados e suas constantes de inibição (Ki) determinadas. Em testes com substratos naturais da ECA, angiotensina I e bradicinina, foi constatada a maior inibição da hidrólise da angiotensina I por quatro PROs. Todos os PROs in vivo reduziram a pressão arterial, e seis deles aumentaram a frequência cardíaca em ratos Wistar. Com isto, conclui-se que existem toxinas no veneno de serpentes do gênero Bitis responsáveis pela hipotensão.
Título em inglês
Analysis of the low molecular mass constituents from the venom of four species of the Bitis genus and biological activities.
Palavras-chave em inglês
Bitis
Angiotensin-converting enzyme (ACE)
Bradykinin-potentiating peptide (BPP)
Hypotension
Proline-rich oligpeptide
Venom
Resumo em inglês
In the sub-saharian Africa, snakes from the Bitis genus are of extreme medical importance, since its victims show symptoms as local tissue damage, hemorrhage and a severe hypotension. This work identified molecules that inhibit the angiotensin I converting enzyme (ACE) in the venom of 4 snakes from the Bitis genus. The low molecular portions of the venom of these snakes were fractionated in RP-HPLC and the fractions that efficiently inhibited the ACE activity were analyzed by mass spectrometry. 34 proline-rich oligopeptides were identified, 8 of them synthesized and had their inhibition constants (Ki) determined. In tests using natural substrates of ACE, angiotensin I and bradykinin, the angiotensin I hydrolysis were better inhibited by four PROs. In vivo tests results showed that all PROs decreased the mean arterial pressure and six of them increased the heart rate. Therefore, we can conclude that there are toxins present in the venom of Bitis capable of cause hypotension.
 
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Data de Publicação
2015-12-07
 
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