O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de S. aureus e E. coli O157: H7 no leite de vacas com mastite subclínica e no leite de mistura de 42 propriedades leiteiras localizadas em duas regiões do Estado de São Paulo: São Carlos e Ribeirão Preto. Paralelamente, entre os isolados de S. aureus foi objetivo identificar os produtores de toxinas e determinar sua origem epidemiológica. O isolamento de S. aureus foi realizado em agar Baird-Parker (35ºC, 48h) e a confirmação bioquímica através da catalase, coagulase, termonuclease, produção de acetoína e fermentação aeróbia da maltose. O isolamento de E. coli O157: H7 foi realizado em agar Sorbitol MacConkey MUG (35ºC, 24h). Para confirmação utilizaram-se as provas do IMVC e sorologia através do kit Soro Anti E. coli O157. Para a detecção da TSST-1 e das enterotoxinas A, B, C e D utilizou-se aglutinação reversa passiva em látex (RPLA). A identificação epidemiológica dos isolados de S. aureus foi realizada por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). A ocorrência de S. aureus no leite individual nas regiões 1 (São Carlos) e 2 (Ribeirão Preto) foram 3,9% e 6,7%, respectivamente. Animais pertencentes às propriedades leiteiras com produção entre 400 L e 1.000 L/dia apresentaram maior risco de veiculação de S. aureus através do leite quando comparadas com propriedades com produção < 400 L e > 1.000 L/dia. Quanto ao leite de mistura, verificou-se que a ocorrência de S. aureus foi a mesma em ambas as regiões (19%). A produção simultânea das enterotoxinas B e C foi observada em 4,7% dos isolados de leite individual, enquanto que 4,7% produziram enterotoxina A e toxina TSST-1. A produção de TSST-1, isoladamente, foi constatada em 14,3% dos isolados de leite individual e em 25% do leite de mistura. Houve similaridade genética entre os isolados de S. aureus, evidenciando sua dispersão epidemiológica entre as propriedades avaliadas. A ocorrência de E. coli O157: H7 no leite individual foi 1% na região 1 e 1,6% na região 2. No leite de mistura não foi detectada E. coli O157: H7. Ressalte-se a importância de medidas preventivas para assegurar a qualidade do leite durante a ordenha, a fim de evitar a ocorrência de microrganismos patogênicos, principalmente S. aureus, e conseqüentemente prevenir riscos de veiculação de toxinfecções através deste alimento.

The aim of this study was to verify the occurrence of S. aureus and E. coli O157: H7 in the milk from dairy cows with subclinical mastitis and in the bulk milk from 42 dairy farms located in two regions of São Paulo State (Region 1: São Carlos, Region 2: Ribeirão Preto). Among the S. aureus strains isolated, the aim was to identify the toxin producers and their epidemiological origin. The isolation of S. aureus was conducted using Baird-Parker agar, and the strains were confirmed by catalase, coagulase, thermonuclease, maltose aerobic fermentation and acetoin production. The isolation of E. coli O157: H7 was conducted using Sorbitol MacConkey MUG agar. The strains were confirmed by IMVC and serology using anti E. coli O157 sera. Rapid passive latex agglutination was used for detection of TSST-1 and enterotoxigenic strains of S. aureus. The epidemiological identification was performed using pulsed field gel electrophoresis (PFGE). S. aureus was isolated from 3.9% and 6.7% of the individual milk samples from regions 1 and 2, respectively. Dairy cows belonging to farms with milk production ranging from 400 to 1.000 L/day showed higher risk of S. aureus carrying-over, when compared with dairy farms with milk production < 400 L/day and > 1.000 L/day. In bulk milk samples, the occurrence of S. aureus was the same in both regions evaluated (19%). The simultaneous production of enterotoxin B and C was observed in 4.7% of strains isolated from individual milk samples, while 4.7% produced both enterotoxin A and TSST-1. TSST-1 production alone was observed in 14.3% of S. aureus strains isolated from individual milk and 25% of bulk milk samples. S. aureus strains tested by PFGE demonstrated genetic similarity, showing the dispersion patterns of this microorganism among dairy farms. E. coli O157: H7 was isolated from 1% and 1.6% of individual milk samples from regions 1 and 2, respectively, although it was not detected in bulk milk samples. The importance of preventive measures to ensure milk quality during milking extraction is stressed, aiming to avoid pathogenic agents, mainly S. aureus, and therefore, to prevent the carry-over of food borne diseases to humans through milk.