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Dissertação de Mestrado
DOI
https://doi.org/10.11606/D.60.2020.tde-16042020-085855
Documento
Autor
Nome completo
Wellington Tavares de Sousa Júnior
E-mail
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
Ribeirão Preto, 2020
Orientador
Banca examinadora
Antunes, Lusania Maria Greggi (Presidente)
Martins, Isarita
Navarro, Anderson Marliere
Título em português
Avaliação do uso de microamostragem volumétrica absortiva para determinação de elementos químicos no sangue por ICP-MS
Palavras-chave em português
DBS
ICP-MS
Sangue
VAMS
Resumo em português
Os elementos químicos desempenham um papel fundamental na saúde humana. Assim, é importante monitorar os níveis destes, a fim de avaliar a exposição da população. O uso de coletas alternativas têm sido proposta para determinação de elementos químicos, como o Dried Blood Spot (DBS). As análises quantitativas empregando este sistema apresentam duas limitações: efeito do hematócrito e não-homogeneidade do analito. Diante destas limitações, outras técnicas de coleta foram criadas, como o VAMS (microamostragem volumétrica absortiva). Este dispositivo consiste em uma ponta branca absorvente ligada a uma haste de plástico, projetada para absorver um volume fixo de amostra, de 10 ou 20 µL. Este sistema supera as desvantagens do DBS e tem sido utilizado na determinação de uma ampla variedade de analitos. Os métodos propostos para análises de elementos químicos com VAMS limitam-se à determinação de poucos analitos e/ou utilizam técnicas analíticas mais complexas e de maior custo. Assim, o presente trabalho objetivou desenvolver e validar uma metodologia com VAMS de 20 µL, para determinação de Li, Be, Mg, Mn, Co, Ni, Zn, Cu, As, Se, Rb, Sr, Cd, Cs, Ba, Hg, Tl, Pb e Bi no sangue total, por meio de espectrometria de massas com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS), e estabelecer um protocolo de descontaminação para viabilizar a reutilização do dispositivo. O método apresentou valores adequados de linearidade, limite de detecção e limite de quantificação, bem como valores satisfatórios de recuperação (próximos a 100%) e precisão (< 10%). Dentre os analito estudados, foi encontrado uma contaminação importante de Li e Ni. O volume de sangue absorvido pelo polímero não apresentou diferença estatística (p > 0,05) comparado ao relatório de conformidade do fabricante, no entanto, apresentou diferença estatisticamente significante (p < 0,05) de uma pipeta calibrada. O uso do banho de ultrassom por 30 minutos mostrou-se uma boa opção para processamento do VAMS, por ser eficiente na extração de todos os analitos (recuperações próximas de 100%) e permitir o preparo de um maior número de amostras em um tempo relativamente curto. Os dispositivos foram submetidos a um processo de descontaminação, o que possibilitou a quantificação de Ni e Li, bem como dos demais elementos químicos. O método desenvolvido é uma opção para simplificar os processos de coleta de sangue e de preparo de amostra, sendo uma boa alternativa para estudos de biomonitoramento humano em larga escala em populações vulneráveis, principalmente em países com vasta extensão geográfica e áreas de difícil acesso, como o Brasil.
Título em inglês
Evaluation of volumetric absorptive microsampling for chemical elements determination in blood by ICP-MS
Palavras-chave em inglês
Blood
DBS
ICP-MS
VAMS
Resumo em inglês
The chemical elements play a key role in human health. Thus, it is important to monitor their levels to assess the exposure of the population. Alternatives collections has been proposed for the determination of chemical elements, such as Dried Blood Spot (DBS). Quantitative analyzes employing DBS has two limitations: hematocrit effect and non homogenity. Given these limitations, other collection techniques were created, such as VAMS (volumetric absorptive microsampling). This device consists an absorbent tip attached to a plastic holder designed to absorb a fixed sample volume of 10 or 20 µL. The VAMS system overcomes the disadvantages of DBS and has been used to different analytes. The proposed methods for chemical analysis with VAMS are limited to the determination of few analytes or use a complex and costly analytical techniques. Thus, the present work aimed to develop and validate a methodology using VAMS for the determination of Li, Be, Mg, Mn, Co, Ni, Zn, Cu, As, Se, Rb, Sr, Cd, Cs, Ba, Hg, Tl, Pb and Bi in whole blood by ICP-MS and establish a decontamination protocol to enable a reuse of the device. The method presented adequate values of linearity, limit of detection and limit of quantification, as well as satisfactory values of recovery (close to 100%) and precision (<10%). An important contamination of Li and Ni was found. The volume of blood absorbed by the polymer showed no statistical difference (p> 0.05) to the manufacturer's certificate of conformance, however, it showed a statistically significant difference (p <0.05) from a calibrated pipette. The ultrasound bath for 30 minutes proved to be a good option for VAMS processing, with efficient extraction (recoveries close to 100%) and preparation of a larger number of samples in a relatively short time. The VAMS devices were subjected to a decontamination process, which made it possible to quantify Ni and Li, as the other chemical elements. The developed method is an option to simplify blood collection and sample preparation processes, and is a good alternative for large-scale human biomonitoring studies in vulnerable populations, especially in countries with large geographical areas and hard-to-reach areas such as Brazil.
 
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Data de Publicação
2020-05-12
 
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