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Tese de Doutorado
DOI
https://doi.org/10.11606/T.43.2006.tde-04122006-150637
Documento
Autor
Nome completo
Félix Más Milián
E-mail
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
São Paulo, 2006
Orientador
Banca examinadora
Deppman, Airton (Presidente)
Duarte, Sérgio José Barbosa
Ferreira, Rita de Cassia Cafe
Lamy, Maria Teresa Moura
Tavares, Odilon Antonio Paula
Título em português
Estudo in vitro dos efeitos radiobiológicos no DNA plasmidial com radiações ionizantes de baixo LET
Palavras-chave em português
Efeitos radiólogicos
Eletroforese
Interação radiação-DNA
Quebras no DNA
Resumo em português
O estudo da interação da radiação com moléculas de DNA tem se intensificado nos últimos anos, determinando avanços nas técnicas experimentais e na compreensão teórica desse fenômeno. No entanto, falta ainda um estudo sistemático e com boa precisão da interação de diferentes radiações com o DNA em condições controladas. Neste trabalho desenvolveu-se uma técnica experimental que permite o estudo daquela interação com diferentes radiações, permitindo uma análise quantitativa dos efeitos da radiação sobre o DNA, mais especificamente, da produção de single- e double strand breaks em moléculas de DNA plasmidial irradiados em solução aquosa com diferentes concentrações de scavengers. Para o desenvolvimento desse trabalho, foram realizados diversos testes para encontrar as condições ideais para se reduzir as incertezas na quantificação das diferentes quebras no DNA. Desenvolveu-se também um programa computacional que permite uma análise precisa da imagem da eletroforese, que oferece ferramentas úteis para a análise quantitativa. Com isso, reduziram-se as incertezas e flutuações experimentais, o que permitiu o estudo da interação radiação-DNA em condições de concentrações de scavengers muito baixas. Os resultados são compatíveis com os dados experimentais, nas condições onde estes já existiam, e compatíveis com o esperado teoricamente nas condições onde não existem dados experimentais para a comparação
Título em inglês
A study in vitro of the radiobiological effects in plasmid DNA with low LET ionizing radiations
Palavras-chave em inglês
DNA breakage
DNA radiation interaction
Electrophoresis
Radiobiological effects
Resumo em inglês
The interaction of radiation with DNA molecules has been intensively studied in the last years, allowing improvements on the experimental techniques and on the theoretical comprehension of the phenomena involved in that interaction under controlled conditions. In this work, a new experimental technique has been developed which enables one to study the radiation-DNA interaction for different radiations and with reduced uncertainties, allowing a quantitative analysis of single- and double-strand breaks on DNA in aqueous solutions with different scavenger concentrations. To this end, many experimental tests were performed in order to find the best experimental condition for reducing the uncertainties. A software was developed for quantitative analysis of the electrophorese image, offering the most important tools for accurate quantification of the DNA products. An important reduction on uncertainties was achieved, allowing the extension of experimental studies to the low scavenger concentration region. The results are in good agreement with experimental data at those conditions where these experiments were already performed, and in agreement with the theoretical model where there are no experimental results to compare with.
 
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1548092.pdf (4.17 Mbytes)
Data de Publicação
2006-12-12
 
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