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Doctoral Thesis
DOI
https://doi.org/10.11606/T.42.2016.tde-16112016-160352
Document
Author
Full name
Sandra Patricia Kalil Perdomo
Institute/School/College
Knowledge Area
Date of Defense
Published
São Paulo, 2016
Supervisor
Committee
Daffre, Sirlei (President)
Miguel, Danilo Ciccone
Silber, Ariel Mariano
Tanaka, Aparecida Sadae
Véliz, Mauro Javier Cortez
Title in Portuguese
Caracterização do estresse oxidativo das células embrionárias do carrapato Rhipicephalus microplus (BME26) em resposta à infecção por Anaplasma marginale
Keywords in Portuguese
Anaplasmose
Carrapatos
Estresse oxidativo
Expressão gênica
Imunidade
Riquétsias
RNA de interferência
Abstract in Portuguese
As espécies reativas de oxigênio (ERO) e de nitrogênio (ERN) são essenciais na resposta imune dos artrópodes aos microrganismos. Este estudo teve como objetivo a caracterização do estresse oxidativo das células embrionárias BME26 do carrapato R. microplus em resposta à infecção por A. marginale. Mostrou-se que A. marginale invade as células BME26 durante a primeira hora. No perfil de expressão de diversos genes codificadores de proteínas que estão envolvidas na produção e destoxificação de ERO e ERN após desafios com A. marginale e R. rickettsii, foi observado que A. marginale inibiu os transcritos das enzimas oxidantes 72 horas após a infecção. Em contrapartida os genes codificadores das enzimas antioxidantes foram todos induzidos. O perfil de expressão gênica pela infecção por R. rickettsii foi diferente do obtido com A. marginale uma vez que se detectou uma maior indução dos genes oxidantes e repressão dos antioxidantes. O silenciamento de quatro genes antioxidantes por RNAi indicaram o envolvimento da resposta redox no controle da infecção por A. marginale. Com isto se demonstra que o estresse oxidativo é importante no controle da infecção pela bactéria nas células BME26 podendo afetar a capacidade vetorial do carrapato na transmissão desse patógeno.
Title in English
Characterization of the oxidative stress in embryonic cells from Rhipicephalus microplus (BME26) in response to Anaplasma marginale infection.
Keywords in English
Anaplasmosis
Gene expression
Interference RNA
Oxidative stress
Rickettsiae
Ticks imunity
Abstract in English
The production of reactive oxygen species (ROS) and nitrogen (ERN) is essential in the immune response of the arthropods. The aim of this study was the characterization of the oxidative stress of the embryonic cell line BME26 from the cattle tick R. microplus in response to A. marginale infection. It was shown that A. marginale invade BME26 cells during the first 1 hour. The expression profile of sixteen genes encoding proteins involved in either production or detoxification of ROS and RNS in response to A. marginale e R. rickettsii, was shown A. marginale caused a down-regulation of the genes encoding the oxidant enzymes in 72 hours after infection. In contrast the genes encoding the antioxidant were induced. The gene expression pattern in response to R. rickettsii was different from that triggered by A. marginale challenge, with induction of oxidant genes and down-regulation of antioxidant genes. The knockdown of four genes encoding the antioxidant enzymes by RNAi suggests that redox response play a role in the control of infection by A. marginale. Our dataset have shown the importance of the oxidative stress to control A. marginale infection by BME26 cells and might have implications on the vectorial capacity of R. microplus in transmission of this pathogen.
 
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Publishing Date
2016-11-16
 
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