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Mémoire de Maîtrise
DOI
10.11606/D.42.2014.tde-20022015-165502
Document
Auteur
Nom complet
Ângela Alice Amadeu Megale
Unité de l'USP
Domain de Connaissance
Date de Soutenance
Editeur
São Paulo, 2014
Directeur
Jury
Silva, Wilmar Dias da (Président)
Carvalho, Enéas de
Isaac, Lourdes
Titre en portugais
Desenvolvimento de anticorpos anti-peptídeos sintéticos derivados da proteína transportadora de fosfato dependente de sódio NaPi2b.
Mots-clés en portugais
Anticorpos
Câncer ovariano
Moléculas carreadoras
NaPi2b
Peptídeos
Proteína
Resumé en portugais
Dois peptídeos, designados Let#1 e Let#2, foram delineados do segundo laço extracelular da proteína NaPi2b. Após conjugação, os peptídeos induziram produção de anticorpos específicos em coelhos e camundongos. Os anticorpos com maiores títulos foram selecionados para ensaios complementares. Estes anticorpos reconheceram os peptídeos conjugados aos carreadores pelos métodos de ELISA e WB, não havendo reação cruzada quando testados com a proteína carreadora livre e com antígeno sintético inespecífico. Após a completa validação, foi possível observar que os anticorpos anti-peptídeos reconhecem NaPi2b nativa, presente na superfície de células OV-CAR, bem como mostraram reconhecimento de um alvo comum em todos os soros analisados, mesmo quando o soro era considerado negativo para COV pelo teste comercial. Este reconhecimento não foi observado quando as amostras foram analisadas pelo soro pré-imune dos animais teste, sugerindo um reconhecimento específico dos anticorpos produzidos.
Titre en anglais
Development of anti-synthetic peptides antibodies derived from sodium-dependent phosphate transporter NaPi2b protein.
Mots-clés en anglais
Antibodies
Carriers molecules
NaPi2b
Ovarian cancer
Peptides
Protein
Resumé en anglais
Two peptides, designated Let#1 and Let#2, were outlined from the second extracellular loop of the NaPi2b protein. After conjugation, the peptides induced the production of specific antibodies in rabbits and mice. Antibodies with higher titers were selected for complementary tests. These antibodies recognized peptides conjugated to the carrier by ELISA and WB, with no cross-reaction when tested with the free carrier protein and nonspecific synthetic antigen. After complete validation, it was observed that the anti-peptide antibodies recognize native NaPi2b protein present on the OV-CAR cell surface and showed recognizing a common target in all sera tested, even when the serum was considered negative for ovarian carcinonoma by commercial test. This recognition was not observed when the samples were analyzed by pre-immune serum of test animals, suggesting specific recognition of antibodies produced.
 
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Date de Publication
2015-02-24
 
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