Receptores do tipo Toll (TLRs) e o receptor do fator ativador de plaquetas (PAF-R) são altamente expressos em macrófagos. Neste estudo, investigamos o efeito da ativação do PAF-R na resposta de macrófagos peritoneais a agonistas de TLR. Descobrimos que PAF exógeno inibiu a produção de citocinas pró-inflamatórias (IL-6, IL-12p40 e TNF-α) e aumentou a produção de IL-10 em macrófagos estimulados com Pam3Cys (TLR2) e LPS (TLR4), mas não Poly(I:C) (TLR3). PAF não afetou a expressão de MyD88 e TRIF, sugerindo que o efeito do PAF na modulação das citocinas é downstream aos adaptadores. PAF inibiu a fosforilação induzida por LPS da subunidade p65 do NF-κB que direciona a expressão de genes pró-inflamatórios, e aumentou a fosforilação da proteína precursora p105 do NF-κB, que induz a expressão da IL-10. Esses resultados indicam que em macrófagos ativados com LPS, a diminuição da atividade transcricional da p65 e o aumento da fosforilação da p105 induzidos pelo PAF são responsáveis pela downregulation das citocinas pró-inflamatórias e upregulation da IL-10, respectivamente.

Toll-like receptors (TLRs) and platelet-activating factor receptor (PAF-R) are highly expressed in macrophages. In this work, we investigated the effect of PAF-R activation on peritoneal macrophages responses to TLR agonists. We found that exogenous PAF inhibited the production of pro-inflammatory cytokines (IL-12p40, IL-6 and TNF-α) and increased IL-10 in macrophages challenged with Pam3Cys (TLR2) and LPS (TLR4), but not by Poly(I:C) (TLR3). PAF did not affect MyD88 and TRIF expression, suggesting that PAF modulation on cytokines is downstream to adaptors. PAF inhibited LPS-induced phosphorylation of NF-κB p65 that drives inflammatory cytokine gene expression and increased NF-κB p105 precursor phosphorylation, which induces IL-10 expression. These findings indicate that in LPS-activated macrophages, the impaired transcriptional activity of p65 subunit and enhanced p105 phosphorylation induced by PAF are responsible for the downregulation of pro-inflammatory cytokines and up-regulation of IL-10, respectively.