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Doctoral Thesis
DOI
https://doi.org/10.11606/T.42.2007.tde-29012008-125605
Document
Author
Full name
José Freire da Silva Neto
Institute/School/College
Knowledge Area
Date of Defense
Published
São Paulo, 2007
Supervisor
Committee
Marques, Marilis do Valle (President)
Farah, Shaker Chuck
Gomez, José Gregorio Cabrera
Netto, Luis Eduardo Soares
Sluys, Marie Anne van
Title in Portuguese
Estudo do papel dos fatores sigma alternativos sE e sN  de Xylella fastidiosa.
Keywords in Portuguese
Xylella fastidiosa.
Biologia Molecular
Fatores Sigma
Microbiologia
Regulação gênica
Respostas a estresse em bactérias
Abstract in Portuguese
Linhagens mutantes foram obtidas para os fatores sigma sE (RpoE) e sN (RpoN) da bactéria Xylella fastidiosa. O mutante rpoE mostrou-se sensível a etanol e a choque térmico. Análises de microarranjo de DNA, de RT-PCR quantitativo e mapeamento de sítios de início de transcrição permitiram definir o regulon sE em resposta ao choque térmico. Verificou-se co-transcrição entre os genes que codificam para sE, seu anti-sigma e uma protease, e sE não se mostrou auto-regulado, mas regulou o gene do anti-sigma. Análises similares às acima indicaram que o gene pilA, codificando a pilina da fímbria tipo IV, é positivamente regulado por sN, enquanto o operon codificando proteínas da fímbria tipo I é regulado negativamente, explicando a maior formação de biofilme e auto-agregação no mutante rpoN. O perfil temporal de expressão da linhagem selvagem J1a12 em carência de nitrogênio foi determinado, além de genes induzidos por carência de nitrogênio via sN. Assim, sN regula genes de fímbrias e de resposta à carência de nitrogênio em Xylella fastidiosa.
Title in English
Role of the alternative sigma factors sE and sN in Xylella fastidiosa.
Keywords in English
Xylella fastidiosa
Bacterial stress response
Gene Regulation
Microbiology
Molecular Biology
Sigma factors
Abstract in English
Mutant strains were obtained for the sigma factors sE (RpoE) and sN (RpoN) in Xylella fastidiosa. The rpoE mutant showed to be sensitive to ethanol and heat shock. Microarray and quantitative RT-PCR analyses and determination of transcription start sites permitted to define the sE regulon under heat shock. Co-transcription of the genes encoding sE , its anti-sigma factor and a protease was observed, and sE did not present auto-regulation, but it regulated the gene encoding the anti-sigma. Similar analyses indicated that the pilA gene, encoding the pilin of the type IV fimbriae, is positively regulated by sN, while the operon encoding proteins of the type I fimbriae is negatively regulated, what explains the increased biofilm formation and auto-aggregation in the rpoN strain. Temporal expression profile of wild type strain J1a12 under nitrogen starvation was determined, as well as genes induced by nitrogen starvation via sN. Thus, sN regulates genes encoding fimbriae and genes for nitrogen starvation response in Xylella fastidiosa.
 
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This document is only for private use for research and teaching activities. Reproduction for commercial use is forbidden. This rights cover the whole data about this document as well as its contents. Any uses or copies of this document in whole or in part must include the author's name.
Publishing Date
2008-02-08
 
WARNING: The material described below relates to works resulting from this thesis or dissertation. The contents of these works are the author's responsibility.
  • da Silva Neto, Jose F, et al. Global gene expression under nitrogen starvation in Xylella fastidiosa: contribution of the sigma54 regulon [doi:10.1186/1471-2180-10-231]. BMC Microbiology [online], 2010, vol. 10, p. 231.
  • SILVA NETO, J. F., et al. Role of σ54 in the regulation of genes involved in type I and type IV pili biogenesis in Xylella fastidiosa [doi:10.1007/s00203-007-0314-x]. Archives of Microbiology [online], 2008, vol. 189, p. 249-261.
  • SILVA NETO, J. F., et al. The single extracytoplasmic function sigma factor of Xylella fastidiosa is involved in the heat shock response and presents an unusual regulatory mechanism [doi:10.1128/jb.00986-06]. Journal of Bacteriology [online], 2007, vol. 189, p. 551-560.
  • SILVA NETO, J. F., et al. O fator sigma ECF sigmaE de Xylella fastidiosa apresenta um novo sistema de regulação. In 25ª Reunião de Genética de Microrganismos, São Pedro, 2006. Resumos da 25ª Reunião de Genética de Microrganismos., 2006. Resumo.
  • SILVA NETO, J. F., e MARQUES, MV. Estudo da regulação do fator sigma de função extracitoplasmática E de Xylella fastidiosa em resposta a estresses. In XXIII Congresso Brasileiro de Microbiologia, Santos, 2005. Programa e Resumos do XXIII Congresso Brasileiro de Microbiologia., 2005. Resumo.
  • SILVA NETO, J. F., e MARQUES, MV. Identificação de genes regulados pelo fator sigma alternativo E de Xylella fastidiosa. In 51o Congresso Brasileiro de Genética, Águas de Lindóia, 2005. Resumos do 51o Congresso Brasileiro de Genética., 2005. Resumo.
  • Disrupção dos genes que codificam para os fatores sigma alternativos de Xylella fastidiosa. Trabalho eleito como melhor da área de Genética Molecular de Bactérias - 24a Reunião de Genética de Microrganismos
  • Identificação de genes regulados pelo fator sigma alternativo E de Xylella fastidiosa. Trabalho eleito como melhor da área de Genética de Microorganismos - 51o Congresso Brasileiro de Genética
  • O fator sigma ECF sigmaE de Xylella fastidiosa apresenta um novo sistema de regulação. Trabalho recebeu Menção Honrosa - 25ª Reunião de Genética de Microrganismos
  • Orientadora de José Freire da Silva Neto, ganhador do premio Jovem Geneticista 2008 - Sociedade Brasileira de Genética
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