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Doctoral Thesis
DOI
https://doi.org/10.11606/T.42.2017.tde-11052017-152932
Document
Author
Full name
Linda Priscila Guaman Bautista
Institute/School/College
Knowledge Area
Date of Defense
Published
São Paulo, 2017
Supervisor
Committee
Silva, Luiziana Ferreira da (President)
Fernandes, Andrea Balan
Galhardo, Rodrigo da Silva
Piccoli, Rosane Aparecida Moniz
Rezende, Juliana Cardinali
Title in Portuguese
Clonagem e super expressão dos genes do catabolismo de xilose em Burkholderia sacchari e avaliação do seu efeito na repressão catabólica e produção de polihidroxibutirato a partir de açúcares hemicelulósicos.
Keywords in Portuguese
Burkholderia sacchari
Lignocellulose
Poli-3-Hidroxibutirato
Xilose
Abstract in Portuguese
A produção de PHAs é limitada devido ao alto custo da fonte de carbono para á produção. No Brasil, o uso de xilose uma fonte de carbono abundante no bagaço de cana é uma alternativa. Neste estudo o catabolismo de xilose em B. sacchari foi estudado para explorar seu potencial para a produção de PHB. Primeiro a organização do operon de xilose foi descrita e foi demostrado que a superexpressão de xylAB melhoro a velocidade máxima de crescimento assim como o teor de acumulo de PHB. Depois foi identificado o fenômeno de repressão catabólica, o qual foi abolido a traves da superexpressão dos genes xylE xylAB. Finalmente foi criado um set de plasmídeos induzíveis para fazer engenharia no consume de xilose em B. sacchari. A superexpressão de xylR permitiu que B. sacchari atinge a velocidade máxima de crescimento mais alta reportada e o melhor fator de conversão de xilose a PHB. Foi concluído então que a superexpressão de xylAB e xylR ajudam a melhorar a velocidade máxima de crescimento e a capacidade de acumulo de PHB usando xylose como fonte de carbono em B. sacchari.
Title in English
Cloning and overexpression of xylose catabolism genes of Burkholderia sacchari and evaluation of the impact on catabolic repression and Polyhydroxybutyrate production using hemicellulosic sugars.
Keywords in English
Burkholderia sacchari
Lignocellulose
Polyhydroxybutyrate
Xylose
Abstract in English
Polyhydroxyalkanoate production is limited by the high production cost of carbon sources. The use of cheap carbon sources like xylose is an alternative to address this issue. In this work we aimed to understand and engineer xylose catabolism in B. sacchari, a bacteria isolated in Brazil to exploit its potential for producing PHB from renewable sources. Initially, we described organization of xylose assimilation genes and demonstrated that xylAB overexpression is an efficient strategy to improve B. sacchari growth rate and production of PHB using xylose as sole carbon source, achieving the highest conversion rate and titer described. Then we identified B. sacchari sequential preference for different sugars (glucose>arabinose>xylose) and overexpress xylE-xylAB to abolish this preference. Finally we created a set of inducible vectors and use them to engineer xylose metabolism. Overexpression of xylR, allowed B. sacchari cells to achieve the highest growth rate and PHB conversion factor and yield reported using xylose as a sole carbon source. Finally, we conclude that overexpression of xylAB and xylR genes improved growth rate, conversion factor and yield when PHB is produced using xylose as carbon source in B. sacchari.
 
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Publishing Date
2017-05-11
 
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