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Dissertação de Mestrado
DOI
10.11606/D.42.2012.tde-09112012-113033
Documento
Autor
Nome completo
Mirian Molnar Rodrigues
Unidade da USP
Área do Conhecimento
Data de Defesa
Imprenta
São Paulo, 2012
Orientador
Banca examinadora
Marques, Marilis do Valle (Presidente)
Martins, Elizabeth Angelica Leme
Silva, Aline Maria da
Título em português
Estudo do papel de duas ferritinas no metabolismo de ferro de Caulobacter crescentus e sua regulação.
Palavras-chave em português
Ferro
Genética bacteriana
Metabolismo
Regulação gênica
Resumo em português
As bactérias usam proteínas intracelulares de estocagem de ferro (ferritinas) que permitem acesso ao metal quando está em baixa quantidade. Neste trabalho, o papel das ferritina Bfr e Dps foi estudado através da análise de fenótipo de linhagens mutantes, e sua regulação foi estudada utilizando o gene repórter lacZ, em ensaios de atividade de b-galactosidase. Os resultados mostraram aumento de expressão de bfr em excesso de ferro, e que este gene é positivamente regulado por Fur. A expressão de dps teve aumento em carência de ferro e na fase estacionária. Ensaios de expressão nas linhagens mutantes DoxyR, DsRNA1 e DsRNA2, mostraram diferenças nos níveis de expressão em comparação aos atingidos na linhagem selvagem. O fator sigma ECF SigJ é importante para níveis máximos de expressão de bfr e o fator SigT para máxima expressão de dps. Foram deletadas as regiões codificadoras de bfr e dps separadamente, ou ambas. Os resultados mostraram que o mutante Ddps e o mutante duplo apresentaram maior sensibilidade a H2O2, tendo a linhagem Dbfr padrão similar à linhagem NA1000. O ensaio de quantificação de ferro mostrou que as ferritinas têm papel equivalente na estocagem de ferro intracelular.
Título em inglês
Study of the role of two ferritins in Caulobacter crescentus iron metabolism and their regulation.
Palavras-chave em inglês
Bacterial genetics
Gene regulation
Iron
Metabolism
Resumo em inglês
Bacteria utilize intracellular iron storage proteins (ferritins) that allow access to the metal when it is present in low amount. In this study the role of ferritins Bfr and Dps was studied by analyzing the phenotype of mutant strains, and their regulation was studied using the lacZ reporter gene, in b-galactosidase activity assays. The results showed increased expression of bfr in iron excess, and that this gene is positively regulated by Fur. dps expression was increased under iron deficiency and in the stationary phase. Expression assays in the mutant strains DoxyR, DsRNA1 and DsRNA2 showed differences in expression levels compared to wild type. ECF sigma factor SigJ is important for maximum levels of bfr expression and SigT for maximal dps expression. The coding regions of bfr, dps or both have been deleted. The results showed that the Ddps and double mutant strains showed increased susceptibility to H2O2, and Dbfr showed a similar pattern to the NA1000 strain. The iron concentration determination showed that both ferritins play equivalent roles in intracellular iron storage.
 
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Data de Liberação
2017-03-05
Data de Publicação
2013-02-08
 
AVISO: O material descrito abaixo refere-se a trabalhos decorrentes desta tese ou dissertação. O conteúdo desses trabalhos é de inteira responsabilidade do autor da tese ou dissertação.
  • RODRIGUES, M. M., SILVA NETO, J. F., e MARQUES, MV. Estudo do papel de duas ferritinas no metabolismo de ferro de Caulobacter crescentus. In 26º Congresso Brasileiro de Microbiologia, Foz do Iguaçu, 2011. Resumos do 26º Congresso Brasileiro de Microbiologia., 2011. Resumo.
  • SILVA NETO, J. F., RODRIGUES, M. M., e MARQUES, MV. Two small RNAs regulated by the Ferric Uptake Regulator. In ASM Conference on Regulating with RNA in bacteria, San Juan, 2011. Abstracts of the ASM Conference on Regulating with RNA in Bacteria., 2011. Resumo.
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