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Disertación de Maestría
DOI
https://doi.org/10.11606/D.42.2012.tde-09112012-113033
Documento
Autor
Nombre completo
Mirian Molnar Rodrigues
Instituto/Escuela/Facultad
Área de Conocimiento
Fecha de Defensa
Publicación
São Paulo, 2012
Director
Tribunal
Marques, Marilis do Valle (Presidente)
Martins, Elizabeth Angelica Leme
Silva, Aline Maria da
Título en portugués
Estudo do papel de duas ferritinas no metabolismo de ferro de Caulobacter crescentus e sua regulação.
Palabras clave en portugués
Ferro
Genética bacteriana
Metabolismo
Regulação gênica
Resumen en portugués
As bactérias usam proteínas intracelulares de estocagem de ferro (ferritinas) que permitem acesso ao metal quando está em baixa quantidade. Neste trabalho, o papel das ferritina Bfr e Dps foi estudado através da análise de fenótipo de linhagens mutantes, e sua regulação foi estudada utilizando o gene repórter lacZ, em ensaios de atividade de b-galactosidase. Os resultados mostraram aumento de expressão de bfr em excesso de ferro, e que este gene é positivamente regulado por Fur. A expressão de dps teve aumento em carência de ferro e na fase estacionária. Ensaios de expressão nas linhagens mutantes DoxyR, DsRNA1 e DsRNA2, mostraram diferenças nos níveis de expressão em comparação aos atingidos na linhagem selvagem. O fator sigma ECF SigJ é importante para níveis máximos de expressão de bfr e o fator SigT para máxima expressão de dps. Foram deletadas as regiões codificadoras de bfr e dps separadamente, ou ambas. Os resultados mostraram que o mutante Ddps e o mutante duplo apresentaram maior sensibilidade a H2O2, tendo a linhagem Dbfr padrão similar à linhagem NA1000. O ensaio de quantificação de ferro mostrou que as ferritinas têm papel equivalente na estocagem de ferro intracelular.
Título en inglés
Study of the role of two ferritins in Caulobacter crescentus iron metabolism and their regulation.
Palabras clave en inglés
Bacterial genetics
Gene regulation
Iron
Metabolism
Resumen en inglés
Bacteria utilize intracellular iron storage proteins (ferritins) that allow access to the metal when it is present in low amount. In this study the role of ferritins Bfr and Dps was studied by analyzing the phenotype of mutant strains, and their regulation was studied using the lacZ reporter gene, in b-galactosidase activity assays. The results showed increased expression of bfr in iron excess, and that this gene is positively regulated by Fur. dps expression was increased under iron deficiency and in the stationary phase. Expression assays in the mutant strains DoxyR, DsRNA1 and DsRNA2 showed differences in expression levels compared to wild type. ECF sigma factor SigJ is important for maximum levels of bfr expression and SigT for maximal dps expression. The coding regions of bfr, dps or both have been deleted. The results showed that the Ddps and double mutant strains showed increased susceptibility to H2O2, and Dbfr showed a similar pattern to the NA1000 strain. The iron concentration determination showed that both ferritins play equivalent roles in intracellular iron storage.
 
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Este documento es únicamente para usos privados enmarcados en actividades de investigación y docencia. No se autoriza su reproducción con finalidades de lucro. Esta reserva de derechos afecta tanto los datos del documento como a sus contenidos. En la utilización o cita de partes del documento es obligado indicar el nombre de la persona autora.
Fecha de Publicación
2013-02-08
 
ADVERTENCIA: El material descrito abajo se refiere a los trabajos derivados de esta tesis o disertación. El contenido de estos documentos es responsabilidad del autor de la tesis o disertación.
  • RODRIGUES, M. M., SILVA NETO, J. F., e MARQUES, MV. Estudo do papel de duas ferritinas no metabolismo de ferro de Caulobacter crescentus. In 26º Congresso Brasileiro de Microbiologia, Foz do Iguaçu, 2011. Resumos do 26º Congresso Brasileiro de Microbiologia., 2011. Resumo.
  • SILVA NETO, J. F., RODRIGUES, M. M., e MARQUES, MV. Two small RNAs regulated by the Ferric Uptake Regulator. In ASM Conference on Regulating with RNA in bacteria, San Juan, 2011. Abstracts of the ASM Conference on Regulating with RNA in Bacteria., 2011. Resumo.
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