A homeostase do cálcio possui um papel central no funcionamento dos tecidos e células animais e torna-se, então, fundamental o entendimento dos mecanismos celulares de transporte de Ca²⁺ transmembrânico, e para isso, os crustáceos têm sido utilizados como modelo de estudo. Caranguejos terrestres e semi-terrestres, devido ao acesso limitado ao meio líquido desenvolveram mecanismos fisiológicos para a conservação de Ca²⁺ (em gastrólitos, hemolinfa e hepatopâncreas), sendo que os crustáceos apresentam quatro tecidos especializados para troca bi-direcional específica de Ca²⁺: (i) brânquias, (ii) epitélio do sistema digestivo, (iii) glândulas antenais e (iv) a camada da hipoderme da cutícula (não analizado no presente projeto). Nesses tecidos, a entrada de Ca²⁺ através de membranas apicais envolve o trocador de Ca²⁺/nNa⁺ (nH⁺) e um canal de Ca²⁺; os trocadores basolaterais, por outro lado, envolvem (i) o trocador de Ca²⁺/Na+ (ii) uma bomba de Ca²⁺- ATPase, e (iii) um canal de cálcio inibido por verapamil. Estudou-se aqui a ação conjugada de inibidores (amiloride e verapamil) e a ação indireta da ouabaína (inibidor da Na⁺/K⁺ ATPase) sobre a tomada de Ca²⁺, visando testar a necessidade de um gradiente de Na⁺ para o transporte secundário de Ca²⁺ em células isoladas de brânquias, glândulas antenais e hepatopâncreas preparadas a partir de animais em fase de inter-muda e pós-muda. Nos caranguejos utilizados no presente projeto (Superfamília Grapsoidea), os quais apresentam diferentes níveis de terrestrialidade: (A) Casmagnathus granulatus T₂, (B) Sesarma rectum T₃ e (C) Goniopsis cruentata T₃., os inibidores amiloride (12,7 mM), verapamil (40 mM), e amiloride + verapamil conjugados, promoveram tendências à redução no transporte de Ca2+. O uso do inibidor ouabaína (17,1 mM), sugere a necessidade de um gradiente de Na+ para o transporte secundário de Ca²⁺. Os resultados obtidos comprovaram também a relação entre o nível de terrestrialidade e as adaptações fisiológicas em relação à homeostase do Ca²⁺ somente em hepatopâncreas, enquanto que a glândula antenal parece não exercer papel relevante na homeostase do Ca²⁺ em caranguejos semi-terrestres.

Calcium homeostasis possess a central role on animal cells and tissues and the understanding of transepithelial Ca²⁺ transport mechanisms becomes fundamental, and crustaceans have been used as study model. Since terrestrial and semi-terrestrial crabs have limited access to water, they have evolved physiological mechanisms in order to conserve Ca²⁺ (in gastroliths, hemolymph and hepatopancreas), and crustacean have shown four specialized tissues for specific bidirectional Ca²⁺ exchange: (i) gills, (ii) the gut epithelia, (iii) antennal glands e (iv) the layer of cuticle hypodermis (not analyzed in this project). In these tissues, the apical Ca²⁺ uptake involves a Ca²⁺/nNa⁺ (nH⁺) exchanger and a Ca²⁺ channel; in contrast, basolateral exchangers may involve: (i) a Na⁺/Ca²⁺ exchanger (ii) a Ca²⁺ ATPase, and (iii) a verapamil-inhibited Ca²⁺ channel. The objective of this project was to study the action of conjugated inhibitors (amiloride and verapamil) and ouabain (Na⁺/K ⁺ ATPase inhibitor) on Ca²⁺ uptake, to show the necessity of a Na⁺ gradient for the secondary Ca²⁺ transport in isolated gills, antennal glands and hepatopancreatic cells from intermoult and postmoult animals. The crabs used in this project (Grapsoidea Superfamily), present different levels of terrestrial adaptations: (a) Casmagnathus granulatus T₂, (b) Sesarma rectum T₃ and (c) Goniopsis cruentata T₃. The inhibitors amiloride (12,7 mM), verapamil (40 mM), and amiloride + verapamil used in this project promoted a tendency to reduce Ca²⁺ transport. The results on ouabain inhibitor (17.1 mM) suggests the necessity of a Na⁺ gradient for secondary Ca²⁺ transport,. The results also suggest a relationship between level of terrestrial adaptation and physiological responses related to Ca²⁺ homeostasis in hepatopancreas, while the antennal gland does not seem to have a relevant role on Ca²⁺ homeostasis in semi-terrestrial crabs.