Recentemente, tem sido investigada a participação do componente simpático eferente do reflexo inflamatório na modulação do sistema imunológico em modelos de inflamação sistêmica. Esta modulação envolve: (a) a transmissão do sinal imune periférico ao sistema nervoso central (SNC) através da ativação das fibras vagais aferentes pelas citocinas pró-inflamatórias; (b) o processamento do sinal imune pelo núcleo do trato ssolitário (NTS) e a ativação de áeras que recebem projeções desse centro integrador, tais como o núcleo rostroventrolateral do bulbo (RVLM) e o núcleo paraventricular do hipotálamo (PVN); e (c) a ativação do nervo esplâncnico e esplênico, resultando em imunossupressão. A angiotensina-(1-7) [Ang-(1-7)], vem sendo apontada como importante neuropeptídeo anti-inflamatório em diversos modelos de inflamação. Entrentanto, não há descrita na literatura uma possível ação da Ang-(1-7) sobre o eixo simpático eferente para o controle da resposta inflamatória na endotoxemia. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar se a Ang-(1-7) pode modular a resposta inflamatória nos ratos endotoxêmicos, via mecanismo central, e se esse efeito é mediado pelo componente simpático eferente do reflexo inflamatório. Para isto, foram utilizados ratos Wistar (215-220 g) que foram submetidos às cirurgias estereotáxica (para administração intracerebroventricular, icv) e de canulação da veia jugular (para administração endovenosa, ev) e da artéria femoral (para aferição da pressão artérial média, PAM e frequência cardíaca, FC). Também foi realizada a simpatectomia química pela administração ev de 6-OHDA (100 mg/Kg) por 24 h. A endotoxemia foi induzida pela administração ev de lipopolissacarídeo (LPS) (1.5 mg/Kg) de acordo com o protocolo experimental avaliado. Observou-se, nos protocolos in vivo, que a administração icv de Ang-(1-7) (0.3 nmol 2 ?L), via receptor Mas (A779, antagonista seletivo, 3 nmol 2 ?L) não alterou o aumento na concentração plasmática de corticosterona e AVP, mas atenuou a concentração sérica e tecidual (baço e fígado) das citocinas fator de necrose tumoral alfa (TNF-?), interleucina-1? (IL-1?), interleucina-6 (IL-6) e de óxido nítrico (NO) induzida pelo LPS, além de elevar a concentração de interleucina-10 (IL-10), e esta ação anti-inflamatória foi abolida com a simpatectomia química. Um perfil similar de resposta foi observado no protocolo in vitro, onde a dose de LPS (1 ?g/mL), após 24 h, foi capaz de induzir a síntese de TNF-? e a expressão proteica da enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS), enquanto à estimulação com noradrenalina (NE; 0.1 ?M) atenuou esses efeitos nos macrófagos peritoneais. Em um segundo protocolo in vivo, verificamos que a Ang-(1-7) foi capaz de restabelecer a pressão arterial média (PAM), sem afetar a resposta taquicardica induzida pelo LPS. No protocolo ex vivo, os anéis de artéria aorta torácica dos animais endotoxêmicos apresentaram hiporesponsividade à NE, de maneira dependente da produção de NO pelo tecido perivascular (PVAT) e de hiperpolarização, enquanto a administração icv Ang-(1-7) restabeleceu a responsividade vascular. Em outro set de protocolos in vitro, utilizando a cultura de células da musculatura lisa vascular (VSMC), verificou-se que a produção de NO e TNF-? pelo PVAT, em resposta ao LPS (1 h). Já a estimulação conjunta com NE, atenuou o efeito pró-inflamatório do LPS sobre o PVAT e elevou a concentração intracelular de Ca+2 ([iCa+2]) nas VSMC. Em conjunto, os resultados sugerem que a Ang-(1-7), via receptor Mas, module o componente simpático do reflexo inflamatório e exerça seu efeito anti-inflamatório sobre o baço, fígado e PVAT, resultando no restabelecimento da responsividade vascular e hipotensão, que podem ter ser responsáveis pela melhora na sobrevida dos ratos tratados com LPS

Currently, it has been investigated the participation of sympathetic efferent component of inflammatory reflex in system immune modulation in inflammatory experimental models. This modulation involves: (a) the peripheral signal immune transmission for central nervous system (CNS) through afferent vagal activation by proinflammatory cytokines; (b) immune signal processing by nucleus tractus solitarius (NTS) and activation of others areas, such as the rostral ventrolateral medulla (RVLM) and the paraventricular nucleus of the hypothalamus (PVN); (c) the nerves splanchnic and splenic activation resulting in immunodepression. Angiotensin-(1-7) [Ang-(1-7)] has been pointed as important anti-inflammatory neuropeptide in a number of inflammatory models. However, a possible action of Ang-(1-7) on sympathetic efferent axis to inflammatory response control in endotoxemia has not been described in the literature. Thus, the aim of this study was to determine whether the Ang-(1-7) can modulate the systemic inflammatory response in endotoxemic animals via a central mechanism, and whether this effect is mediated by a sympathetic circuit. In this way, we used male Wistar rats (215-220 g) submitted to stereotaxic (for central administration), jugular vein cannulation (for endovenous administration) and femoral artery (for blood pressure and heart ratio measurement) surgeries. Furthermore, was performed a chemical sympathectomy induced by systemic administration of 6-OHDA (100 mg/Kg) for 24 h. Endotoxemia was induced by systemic administration of lipopolysaccharide (LPS) (1.5 mg/Kg) in accordance with experimental protocol assessed. LPS was induced increase in corticosterone and AVP plasma concentration and central Ang-(1-7) administration (0.3 nmol 2 ?L) was not able to change this effect.. We also observed that Ang-(1-7) central administration, via Mas receptor (A779, selective antagonist, 3 nmol 2 ?L) was able to attenuate serum and tissue (spleen and liver) of the tumor necrosis factor alpha (TNF-?), interleukin-1? (IL-1?), interleukin-6 (IL-6) and NO concentration LPS-induced and increased interleukin-10 (IL-10) and the chemical sympathectomy abolished this anti-inflammatory. Similar profile was observed in in vitro protocol where the LPS dose (1 ?g/mL, for 24 h) induced TNF-? synthesis and protein expression of inducible oxide nitric synthase (iNOS) enzyme, whereas these effects were attenuated by noradrenaline (NE; 0.1 ?M) stimulation in peritoneal macrophages culture. In a second in vivo protocol we verified that mean blood pressure was restored by Ang-(1-7) without affecting the tachycardia LPS-induced. When the effect of LPS treatment was analyzed, rings of thoracic aorta artery of endotoxemic rats, we observed a low resistance in response to NE and this effect was dependent on perivascular adipose tissue (PVAT) NO secretion and vascular hyperpolarization, while Ang-(1-7) central administration was able to restore the vascular responsiveness. In another in vitro protocol, using vascular smooth muscle cells (VSMC) culture we observed that NO and TNF-? PVAT production LPS-induced (for 1 h) may have caused decrease of calcium (Ca+2) cytoplasmatic concentration. Concomitant stimulation of NE and LPS stimulation have reduced proinflammatory effect of LPS on PVAT and increased intracellular Ca+2 concentration ([iCa+2]) in VSMC. Taken together, these data suggest that Ang-(1-7), via Mas receptor, controls the sympathetic component of inflammatory reflex and exerts anti-inflammatory effect on spleen, liver and PVAT resulting in vascular responsiveness and blood pressure recovery, wich could be responsible, at least in part, for the improvement in survival in rats treated with LPS